[发明专利]用于判定急性移植物抗宿主病风险的方法

权利要求书

1.一种用于判定候选人类移植供体是否具有在人类移植受体中诱导急性移植物抗宿主病（aGVHD）风险的方法，包括以下步骤：i）对获自候选人类移植供体的生物样本的恒定型NKT（iNKT）细胞群体进行扩增；ii）在步骤i）中获得的群体中检测CD4-iNKT细胞亚群扩增的存在与否；以及iii）当没有从iNKT细胞群体中扩增出亚群CD4-iNKT细胞时，推断出候选人类移植供体在人类移植受体中具有诱导aGVHD的增加的风险。

2.一种选择人类移植供体以在人类移植受体中减少诱导aGVHD风险的方法，包括以下步骤（i）进行根据权利要求1所述的用于判定风险的方法，以及（ii）根据所述风险判定选择所述供体。

3.一种在人类移植受体进行移植物移植术之后用于调节施用至人类移植受体的免疫抑制治疗的方法，包括下列步骤（i）进行根据权利要求1所述的用于判定风险的方法，以及（ii）调节免疫抑制治疗。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中扩增iNKT细胞群体的步骤i）是通过以下进行：（a）从获自所述候选人类移植供体或获自所述人类移植受体的生物样本中分离外周血单核细胞（PBMC）；和（b）在既含有刺激iNKT细胞增殖的试剂又含有活化iNKT细胞的试剂的介质中培养所述PBMC。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述CD4-iNKT细胞亚群是CD3+CD4-TCRVα24Vβ11细胞的群体。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述刺激iNKT细胞增殖的试剂是白介素2（IL-2）。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述活化iNKT细胞的试剂是糖脂抗原，其选自α-半乳糖神经酰胺（α-GalCer）、α-葡萄糖醛酸神经酰胺、磷酸酰肌醇四甘露糖苷、异球三己糖基神经酰胺、神经节苷脂GD3、磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、硫脂、β-半乳糖神经酰胺、脂磷酸聚糖、糖肌醇磷脂、β-异头半乳糖神经酰胺和α-异头半乳糖神经酰胺，以及细菌脂质抗原。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述糖脂抗原是α-GalCer。

9.一种用于实施根据权利要求1至8中任一项所述方法的试剂盒，其包括至少a)刺激iNKT细胞增殖的试剂，b）活化iNKT细胞的试剂以及c）特异性结合CD4的标记试剂。

10.根据权利要求9所述的试剂盒，其中所述刺激iNKT增殖的试剂是IL-2，所述活化iNKT细胞的试剂是α-GalCer。

11.根据权利要求9或10所述的试剂盒，其进一步包括d）特异性结合CD3的标记试剂，以及e）特异性结合iNKT细胞的CD1d限制的TCRVα24Vβ11的标记试剂。