[发明专利]用于判定急性移植物抗宿主病风险的方法

说明书

技术领域

本发明涉及用于预测急性移植物抗宿主病风险的方法和相应产品(如试剂盒)，以及用于选择移植供体和用于调节与这种风险预测相关联的治疗的相应方法。

背景技术

恶性血液病的一线疗法一般包括化学疗法和/或使用单克隆抗体的化学免疫疗法。然而，一些患者经历复发或疾病进展，有时为标准治疗所难以治疗。

包括同种异体干细胞移植(SCT)的免疫疗法代表对这些难以治愈或者不太可能使用标准化学治疗治愈的患者的替代治疗方法。造血干细胞移植(HSCT)是这样一种疗法，其涉及从供体或脐带血取得造血干细胞，并将其静脉输注至经调节以接受移植的受体中。然而，因为严重的移植后并发症包括移植物抗宿主病(GVHD)，移植后的总体生存率仍然仅在40％至60％之间。GVHD是由转移或移植的免疫活性细胞(例如，成熟T细胞)针对宿主组织的免疫反应引起的疾病的总称，并且在某些情况下能诱发严重器官毒性导致死亡。

因此，人类白细胞抗原(HLA)匹配是减少移植物排斥和GVHD风险所必不可少的。然而，非HLA基因也影响到移植结果，甚至在接受来自HLA相同匹配同胞供体(MSD)的移植的患者中GVHD也可能是致命的。此外，MSD仅可用于大约三分之一患者，因此，替代性供体是必要的。更广泛的使用HLA匹配不相关供体(MUD)而不是脐带血或不匹配的相关供体，但在接受来自MUD的移植的患者中，也必须考虑GVHD的风险。

因此，仍然需要一种方法用于预测在接受移植的患者中发展为GVHD的风险(或反之，用于判定候选供体是否具有在受体中诱导GVHD的风险的方法)。

最近，两个回顾性研究，通过分析同种异体HSCT(Rubio等人，Blood2012)或供体移植物(Chaidos等人，2012年)的受体外周血干细胞(PBSC)中效应物和调节性淋巴细胞的频率分布，证明了恒定型(invariant)NKT(iNKT)细胞在预测急性移植物抗宿主病(aGVHD)中的临床相关性。在受体中iNKT细胞的损伤重构或在移植物中低CD4-iNKT细胞剂量被证明表示独立的参数，其能够显著预测HSCT后aGVHD的发生。

然而，医生并不满足于基于在血液或iNKT细胞的移植物样本中直接判定发展aGVHD的风险的预测方法，因为难以确定在低和高iNKT细胞之间的阈值，例如导致对中间结果误判的风险。

发明内容

在第一方面，本发明涉及用于判定候选人类移植供体是否具有在人类移植受体中诱导急性移植物抗宿主病(aGVHD)风险的方法，包括以下步骤：i)对获自候选人类移植供体的生物样本的恒定型NKT(iNKT)细胞群体进行扩增；ii)检测在步骤i)中获得的群体中CD4-iNKT细胞亚群扩增的存在与否；以及iii)当没有从iNKT细胞群体中扩增出亚群CD4-iNKT细胞时，推断出候选人类移植供体具有在人类移植受体中诱导aGVHD的增加的风险。

在第二方面，本发明涉及用于选择人类移植供体以在人类移植受体中减少诱导aGVHD风险的方法，包括以下步骤(i)进行根据本发明的用于判定风险的方法，以及(ii)根据所述风险判定选择所述供体。

在第三方面，本发明涉及在人类移植受体进行移植物移植术之后用于调节施用至人类移植受体的免疫抑制治疗的方法，包括下列步骤(i)进行根据本发明的用于判定风险的方法，以及(ii)调节免疫抑制治疗。

在另一方面，本发明还涉及用于实施根据本发明的上述方法的试剂盒。

具体实施方式

本发明人已经证明，在分析CD4-iNKT细胞亚群的扩增能力(expansioncapacity)之前，将获自候选供体的PBSC移植物或血液样本的iNKT细胞群体扩增12或15天的在先步骤，允许安全地判定所述候选供体是否具有在受体中诱导急性GVHD的风险。事实上，在所述扩增之后，只有两个不同的可能：没有从iNKT细胞群体中扩增出CD4-iNKT细胞亚群(扩增因子≤1)，因此供体具有在受体中诱导急性GVHD的增加的风险，或者从iNKT细胞群体中显著地扩增出CD4-iNKT细胞亚群(扩增因子>1)，因此供体几乎没有在受体中诱导急性GVHD的风险。

判定急性移植物抗宿主病(aGVHD)风险的方法：