[发明专利]基因沉默

权利要求书

1.分离的沉默增强子，其包含SEQ ID NO:6所示核苷酸序列。

2.权利要求1的分离的沉默增强子，其中所述沉默增强子在3’末端还包含1-1342个SEQ ID NO:1所示的连续核苷酸。

3.权利要求1的分离的沉默增强子，其中所述沉默增强子包含SEQ ID NO:5所示核苷酸序列。

4.权利要求1的分离的沉默增强子，其中所述沉默增强子包含SEQ ID NO:4所示核苷酸序列。

5.权利要求1的分离的沉默增强子，其中所述沉默增强子包含SEQ ID NO:3所示核苷酸序列。

6.权利要求1的分离的沉默增强子，其中所述沉默增强子包含SEQ ID NO:18所示核苷酸序列。

7.包含植物可操作启动子的核酸构建体，所述植物可操作启动子与包含权利要求1-6任一项的沉默增强子的核酸分子可操作地连接。

8.权利要求7的核酸构建体，其中所述植物可操作启动子是异源植物可操纵启动子。

9.权利要求7或8的核酸构建体，还包含核酸沉默子分子，所述核酸沉默子分子与包含所述沉默增强子的核酸分子可操作地连接。

10.一种转基因植物细胞，其包含稳定整合在其基因组中的权利要求9的核酸构建体。

11.一种转基因植物，其包含稳定整合在其基因组中的权利要求9的核酸构建体。

12.一种制备转基因植物的方法，所述转基因植物具有对感兴趣的基因更有效的基因沉默，所述方法包括将权利要求9的核酸构建体导入植物中，其中所述转基因植物具有稳定整合在其基因组中的所述核酸构建体。

13.一种制备转基因植物的方法，所述转基因植物具有对感兴趣的基因更有效的基因沉默，所述方法包括将权利要求9的核酸构建体转染进一或多个植物细胞中，并从转染的一或多个植物细胞再生转基因植物，其中所述转基因植物具有稳定整合在其基因组中的所述核酸构建体。

14.一种增强植物细胞中植物基因的基因表达降低的方法，包括在适于核酸沉默子分子表达的条件下培养权利要求10的转基因植物细胞，从而相对于不包含所述沉默增强子的相应转基因植物细胞，植物基因的降低的表达被增强。

15.一种增强植物中植物基因的基因表达降低的方法，包括在适于核酸沉默子分子表达的条件下生长权利要求11的转基因植物，从而相对于不包含所述沉默增强子的相应转基因植物，植物基因的降低的表达被增强。

16.一种增强植物细胞中植物基因的基因表达降低的方法，包括

用权利要求9的核酸构建体转化植物细胞，以产生具有稳定整合在其基因组中的核酸构建体的转基因植物细胞，及

在适于核酸沉默子分子表达的条件下培养所述转基因植物细胞，从而相对于不包含所述沉默增强子的相应转基因植物细胞，植物基因的降低的表达被增强。

17.一种增强植物中植物基因的基因表达降低的方法，包括

用权利要求9的核酸构建体转化植物细胞，以产生具有稳定整合在其基因组中的核酸构建体的转基因植物细胞，

从转基因植物细胞再生转基因植物，其中转基因植物具有稳定整合在其基因组中的所述核酸构建体，及

在适于核酸沉默子分子表达的条件下生长所述转基因植物，从而相对于不包含所述沉默增强子的相应转基因植物，植物基因的降低的表达被增强。

18.一种鉴别可用于在植物中更有效地沉默感兴趣的基因的推定的沉默增强子的方法，所述方法包括：

(a)用第一种核酸构建体转化第一种植物细胞，所述第一种核酸构建体包含与核酸可操作地连接的植物可操作启动子，所述核酸包含与核酸沉默子分子可操作地连接的推定的沉默增强子；

(b)用第二种核酸构建体转化第二种植物细胞，所述第二种核酸构建体包含与核酸沉默子分子可操作地连接的植物可操作启动子；

(c)确定第一种转化的植物细胞及第二种转化的植物细胞中的基因沉默水平；及

(d)如果第一种转化的植物细胞比第二种转化的植物细胞中的基因沉默水平高，则鉴别推定的沉默增强子是沉默增强子。