[发明专利]NK细胞强化型血液制剂的制造方法

说明书

提供能够侵袭性低、简便且迅速地使从生物体采取的血液中的NK细胞等增殖的NK细胞强化型血液制剂的生产方法。通过用包含抗CD16抗体、OK432、抗CD137抗体、和细胞因子的NK细胞增殖刺激因子刺激血液中的NK细胞，然后在生理细胞温度下培养该血液来生产NK细胞强化型血液制剂。

技术领域

本发明涉及使NK细胞活化和增殖了的血液制剂的制造方法、和该血液制剂以及NK细胞活性用组合物。

背景技术

1981年以后，作为恶性新生物的癌成为日本人中死因的第1位，约占全部死亡原因的3成。随着医学的进步，癌的治愈率、生存率得到明显改善，但目前仍然还是难治性疾病。癌的治疗的标准方法为外科疗法、化学疗法和放射线疗法，近年来，免疫疗法作为新的治疗法备受瞩目，到目前为止已经开发了各种方法(非专利文献1)。所谓免疫疗法，是指利用体内的免疫力来进行癌、病毒感染症等的治疗的方法。可举出例如，细胞因子疗法、疫苗疗法、BRM(生物应答调节剂:Biological Response Modifier)疗法、细胞免疫疗法等。

所谓细胞因子疗法，是指通过将具有使T细胞、NK细胞等淋巴细胞增殖或活化的作用的细胞因子直接给予生物体内，从而杀伤癌细胞、病毒感染细胞的治疗法。例如，有通过给予白细胞介素2(IL-2)、干扰素的治疗法等(非引用文献2)。然而，该治疗法在临床结果上并未得到预期那样的效果，还存在产生器官功能不全、体液潴留(给予IL-2的情况下)、感冒症状或精神障害(给予干扰素的情况下)等严重副作用的问题。

所谓疫苗疗法，是指直接或间接地接种对癌细胞特异性抗原或肽，激活针对该抗原的免疫系统的治疗法(非专利文献3)。该治疗法虽然报告了一些有效案例，但是存在对不表达HLA I类的肿瘤等没有效果等问题。

所谓BRM疗法，是指利用修饰患者对肿瘤细胞等的生物应答性的物质的治疗法(非专利文献4)。作为BRM，已知PSK、苯丁抑制素、OK432等。该治疗方法已经在一部分的癌等中确认了有效性，但本来多是作为通过与外科疗法、化学疗法这样的造成免疫力降低的其他治疗法并用来取得效果的辅助疗法。此外，存在免疫力不一定增强、单独使用时的抗癌效果等弱的问题。

细胞免疫疗法是通过将从患者采取的免疫细胞在体外进行活化、增殖等的处理后再次回输到该患者的体内，从而提高该患者的免疫力的治疗法，也称为“过继免疫疗法(广义的过继免疫疗法)”(非专利文献5)。根据体外处理的免疫细胞的种类，细胞免疫疗法分为激活淋巴细胞疗法、树突状细胞疗法。其中，关于树突状细胞疗法，由于临床试验才刚刚开始，所以还未能得到足以判断有效性的结果。

激活淋巴细胞疗法进一步分为在体外对T细胞进行活性·增殖处理的狭义的激活淋巴细胞疗法(激活T淋巴细胞疗法、或狭义的过继免疫疗法)和对NK细胞进行活性·增殖处理的激活NK细胞疗法。

狭义的激活淋巴细胞疗法，例如有LAK(淋巴因子激活的杀伤细胞)疗法、TIL(肿瘤组织浸润淋巴细胞)疗法、CTL(细胞毒性淋巴细胞)疗法等。

LAK疗法是培养从患者采取的淋巴细胞，使T细胞、NK细胞活化或增殖后回输到体内的方法(非专利文献6)。该方法为了维持给予体内的LAK活性，需要向体内给予大量的IL-2，因此，存在伴有与前述利用IL-2的细胞因子疗法同样的副作用、不能获得预期那样的效果的问题。

TIL疗法是采取浸润到肿瘤组织等的淋巴细胞，与LAK疗法同样地体外培养后回输到体内的方法(非专利文献7)。然而，该方法存在只能从手术摘出组织采取淋巴细胞、不能获得预期那样的效果的问题。

CTL疗法是将淋巴细胞与手术采取的癌细胞等一起培养，通过刺激来对该癌细胞等诱导特异性淋巴细胞的方法(非专利文献8)。也有有效案例的报告，但是存在必须通过手术采取癌细胞，因而侵袭性极高，适应症例有限，另外在不能采取并培养癌细胞的情况下治疗变得困难的问题，只对表达主要组织相容性抗原的癌有效等的问题。