[发明专利]一种双基因microRNA荧光定量内参及其引物在贝类组织样品中的应用有效
| 申请号： | 201410002944.2 | 申请日： | 2014-01-03 |
| 公开（公告）号： | CN103740823A | 公开（公告）日： | 2014-04-23 |
| 发明（设计）人： | 黄雯;阙华勇;许飞;李莉;张国范 | 申请（专利权）人： | 中国科学院海洋研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人： | 周秀梅;刘阳 |
| 地址： | 266071*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基因 microrna 荧光 定量 内参 及其 引物 贝类 组织 样品 中的 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种双基因microRNA荧光定量内参及其引物在贝类组织样品中的应用，其特征在于：双基因microRNA荧光定量内参中的两个贝类基因为let-7具有序列表SEQ ID No:1中碱基序列和miR-87具有序列表SEQ ID No:2中碱基序列。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述两个贝类基因let-7和miR-87在贝类的不同组织样品中稳定表达（即，表达量变化小），能够在相对定量法实时荧光定量PCR中作为内参基因。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：同时使用两个稳定表达的microRNA作为双基因内参；双基因内参的表达量Ct值为，let-7和miR-87基因在某组织样品中的表达量Ct值的算术平均数；通过该双基因内参校正上样过程中的实验误差，能够提高实验的准确性。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所用内参基因let-7的特异性引物为：5’-GGGTGAGGTAGTAGGTTGTATAGTT-3’；miR-87的特异性引物为：5’-GGTGAGCAAAGTTTCAGGTGTGT-3’。
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