[发明专利]在禽类中进行转基因表达

权利要求书

1.一种在完全转基因种系鸡中制造外源蛋白质的方法，所述方法包括以下步骤：

将来源于禽类白血病病毒的、不具有选择标记的自失活载体即SIN载体导入所述鸡的胚胎，以产生转基因鸡，其中所述SIN载体包含与输卵管特异性启动子组件可操作连接的、编码外源蛋白质的核苷酸序列，其中所述外源核苷酸序列被整合到所述转基因鸡的基因组内，并且该外源蛋白质在该转基因鸡的输卵管细胞内表达，从输卵管细胞分泌，并且沉积在该转基因鸡的蛋中；

获得完全转基因种系鸡，其产的蛋在蛋白内包含该外源蛋白质；和

从蛋白分离所述外源蛋白质。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述启动子组件与鸡外源性的编码序列连接。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述启动子组件是卵类粘蛋白启动子组件。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述启动子组件是卵清蛋白启动子组件。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述启动子组件是溶菌酶启动子组件。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述外源蛋白质是治疗性蛋白质。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述外源蛋白质是融合蛋白。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述外源蛋白质选自下组：红细胞生成素、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子即GM-CSF、干扰素即IFN、细胞毒性T淋巴细胞抗原4即CTLA4-Fc融合蛋白、生长激素、细胞因子、溶菌酶、β-酪蛋白、白蛋白、α-1抗胰蛋白酶、抗凝血酶III、胶原、因子X、血纤蛋白原、乳铁蛋白、蛋白C、组织型纤溶酶原激活物即tPA、促生长激素、糜蛋白酶、抗体、免疫毒素、因子VIII、b-结构域缺失的因子VIII、因子VIIa、因子IX、抗凝剂、水蛭素、阿替普酶、瑞替普酶、组织纤溶酶原激活物即tPA、tPA-5个结构域中缺失3个、胰岛素、赖脯胰岛素、胰岛素aspart、甘精胰岛素、长效胰岛素类似物、胰高血糖素类、胸腺素刺激激素即tsh、促滤泡素-β、滤泡刺激激素即fsh、血小板衍生生长因子即pdgh、IFN-β、IFN-α1、IFN-α2、IFN-β、IFN-β1b、IFN-β1a、IFN-γ、IFN-γ1b、白介素即IL-2、IL-11、乙肝病毒表面抗原即HBsAg、链道酶-α脱氧核糖核酸酶、β葡糖脑苷脂酶、肿瘤坏死因子即TNF-α、IL-2-白喉毒素融合蛋白、肿瘤坏死因子受体即TNFR-IgG片段融合蛋白、拉罗尼酶、DNA酶、阿法赛特、托西莫单抗、鼠单抗、阿仑单抗、拉布立酶、阿加糖酶β、特立帕肽、甲状旁腺激素衍生物、阿达木单抗、阿那白滞素、奈西立肽、人b-型利钠肽即hbnp、集落刺激因子、培维素孟、人生长激素受体拮抗剂、重组活化蛋白C、奥马珠单抗、免疫球蛋白E阻断物、替伊莫单抗、促肾上腺皮质激素即ACTH、胰高血糖素、生长抑素、生长激素、胸腺素、甲状旁腺激素、色素激素、生长调节素、黄体生长素、绒毛膜促性腺素、下丘脑释放因子、依那西普、抗利尿激素、促乳素、促甲状腺激素、人免疫球蛋白多肽D区、人免疫球蛋白多肽J区、人免疫球蛋白多肽C区、人免疫球蛋白轻链、人免疫球蛋白重链、人免疫球蛋白重链可变区和人免疫球蛋白轻链可变区。