[发明专利]一种控制绵羊毛色Agouti基因拷贝变异检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及一种对绵羊毛色基因检测的试剂盒，特别是一种控制绵羊毛色Agouti基因拷贝变异检测试剂盒。 

背景技术

绵羊、山羊被毛颜色种类很多，其遗传现象也十分复杂。绵羊毛、山羊绒、羔皮、 

裘皮等的颜色均具有重要的经济意义，例如，白色山羊绒比其他颜色的山羊绒价格高。毛色还是品种的重要标志，有些品种的毛色对适应自然环境还起着重要的作用。对细毛羊养羊业来讲，人们的主要目的是为了获得白色优质细毛。近年来，由于国际市场对不经人工染色的天然有色毛织品兴趣增加，有色毛(黑色、褐色)的价格比白色毛贵30％～40％。因此，澳大利亚正在培育黑色美利奴羊，目前数量已达5万只左右。绵、山羊被毛纤维的颜色是由直径约0.1～0.3μm的深色素颗粒形成的，参见：赵有璋.羊生产学(第二版)[M].北京.中国农业出版社.2007。绵羊、山羊毛色的形成主要取决于黑色素及其衍生物的有无与多少，参见：里德U.N，魏H.著.病理学总论与各论.武忠弼主译.北京：人民卫生出版社，1996，129-131.， 

而毛色的种类主要取决于黑色素的种类和分布情况，见：方美英.猪的毛色遗传[J].中国畜牧杂志，2002，38(2)：51-52.。黑色素是一种不溶于水与几乎所有溶剂的无定型小颗粒生物色素，合成和储存场所是黑素小体，参见：Li XL，Zheng GR，Zhou RY,et al.Evolution and differentiation ofMSHR gene in different Species[J]J Hered，2007，98(2)：165-168；Klungland H，Vage DI.Pigmentary switches in domestic animal species[J]Ann N Y Acad Sci，2003，994：331-338.，并由多个基因共同作用以及环境因素影响而形成，见：Sturm RA，Teasdele RD，Box NF.Human pigmentation genes：Identification，structure and consequences of polymorphic variation[J]Gene.2001，277：49-62.。黑色素有两种，一种为真黑色素，以黑色和褐色两种形式存在，不含硫原子；另一种是褐黑色素，以黄色和红色两种形式存在，见：师科荣，王爱国，邓学梅.猪毛色性状遗传机制研究进展[J]养猪，2003，4：24-28.，含硫原子，易溶于碱性溶液。真黑色素跟褐黑色素都是由酪氨酸和苯丙氨酸经一系列酶的催化形成的，合成过程的每个阶段都受到了很多信号分子与特定成分的调节和限制，见：伍革民，彭光旭.动物黑色素研究进展[J]甘肃畜牧兽医，2005，1：39-41。近年来，大量试验成果表明，与黑色素合成调控相关的基因有很多，如TYR、MC1R、C-KIT、MSH、ACIH、ATRN、Agouti、LYST、EDN、Dmbxl及MGF等，其中Agouti就是一个重要的黑色素调控基因，参见：师科荣，王爱国，李宁等.中国地方猪种黑素皮质激素受体1基因(MC1R)的单核苷酸多态性.中国科学C辑， 2004，34(2)：144-149.。Parsons等通过经典遗传学方式分析得知Agouti基因座与被毛显性白色相关，参见：Parsons Y.M,Fleet M.R,Cooper D.W.Investigation of the gene responsible for recessive pigmentation in Australian Merino sheep.ProcAssocAdvancAnimBreed.Genet,1997，6th-10th：447-451.；Parsons Y.M,Fleet M.R,Cooper D.W.Isolation of the ovine Agouti coding sequence.Pigment Cell Research,1999,12(7)：394-397.。Royo等研究Xalda羊Agouti基因在皮肤中mRNA的表达量，发现白色个体Agouti表达量高，见：Royo L.J,Alvarez I,Arranz J.J,Fernandez I，Rodriguez A，Perez-Pardal L，Goyache F. Differences in the expression ofthe ASIP gene are involved in the recessive black coat colour pattern in sheep：evidence from the rare Xalda sheep breed.Animal Genetics,2008,39(3)：290-293.。Norris等研究表明在Soay、澳洲美利奴羊中显性白色是由于一段包含ASIP编码基因、AHCY编码区和ATCH启动子序列多拷贝的190Kb串联片段，由于多拷贝的ATCH启动子启动多拷贝的Agouti基因高表达而形成，参见：Norris Belinda J，Whan Vicki A.A gene duplication affecting expression of the ovine ASIP gene is responsible for white and black sheep.Genome Research,2008，18(8)：1282-1293.。因而开展Agouti基因拷贝数变异检测对于开展绵羊毛色分子标记辅助选择育种的研究具有指导意义。