[发明专利]道地丹参的培育方法

权利要求书

1.一种道地丹参的培育方法，其特征在于包括以下步骤：

1）收集全国野生丹参种质资源建立丹参种质资源圃，建立具有中国代表性的丹参种质资源圃；

2）从形态学、细胞生物学（染色体水平）、分子生物学水平对中国丹参种质资源进行研究，评选出具有代表性的道地丹参种质资源；

3）对评选出的道地丹参种质资源的基因组染色体结构进行鉴定；

4）利用AFLP分子标记技术确定道地丹参DNA条形码；

5）将一个具有隐性标记性状的二倍体道地丹参和一个具有显性标记性状的二倍体（2x）道地丹参，分别进行人工诱变成同源四倍体：4x，含有4个相同的道地丹参功能基因组；

6）三倍体丹参杂交转育，分别将具有隐性标记性状（白花）和具有显性标记性状（紫花）的四倍体丹参，分别与具有相对性标记性状的二倍体道地丹参，2x，含有2个相同道地丹参功能基因组，进行杂交转育：4x♀×2x♂或2x♀×4x♂，获得具有标记性状的三倍体丹参永久杂种：3x，含有3个相同道地丹参功能基因组；

7）脱毒处理：取三倍体丹参杂交当代种子幼苗茎尖或新生幼叶为外植体，用75％酒精和0.1％升汞进行脱毒处理；

8）组培苗克隆快繁：将脱毒处理完的材料接种在1/2MS＋6BA1.5mg/L培养基上，在光周期14小时/天，光强度3000Lux，室温20—25℃条件下进行培养，待材料切割面产生丛生芽，转入含1/2MS＋6BA1mg/L培养基上进行扩大繁殖；

9）瓶苗移栽，待瓶苗新根长2—3公分时，进行瓶苗移栽，移栽前2天打开瓶盖练苗；

10）移栽苗管理，刚移出的瓶苗要半遮光，保持50％左右的湿度，加强管理成活率可达90％以上；

11）新品种评比试验，按常规新品种评比试验要求进行；

12）药材产量、药物主要有效成分含量测定，根据《中华人民共和国药典》规定，对丹参酮ⅡA、丹酚酸B和隐丹参酮进行测定；

13）道地丹参新品种认定：按上述程序，依据得到的丹参药材产量和主要药物有效成分含量，可培育出综合生物学性状好，抗生物及非生物胁迫能力强，全面提高50％以上的道地丹参新品种。

2.按照权利要求1所述的培育方法，其特征在于步骤8）所述的扩大繁殖采用每瓶接种5—10棵苗。

3.按照权利要求1所述的培育方法，其特征在于步骤9）所述的瓶苗移栽是用长摄子取出瓶苗，洗净培养基，直接移栽在经过事先堆积发酵好的磨姑泥与砂土3：1混合营养钵中。