[发明专利]一种区分多重基因检测方案的方法、条形码引物组以及试剂盒条形码系统有效
申请号: | 201410015080.8 | 申请日: | 2014-01-13 |
公开(公告)号: | CN103773862A | 公开(公告)日: | 2014-05-07 |
发明(设计)人: | 余丁;昝乡镇;吴勇;黄迎彬;南丽 | 申请(专利权)人: | 宁波海尔施基因科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 余姚德盛专利代理事务所(普通合伙) 33239 | 代理人: | 胡小永 |
地址: | 315040 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 区分 多重 基因 检测 方案 方法 条形码 引物 以及 试剂盒 系统 | ||
1.一种区分多重基因检测方案的方法,其特征在于,使用条形码引物与多重基因检测试剂盒检测试剂进行同步PCR扩增,通过毛细电泳检测基因片段的长度和数量不同组合来区分多重基因检测方案;包括以下步骤:
步骤1,选取n个条形码基因标准点,并针对条形码基因标准点的位置设计对应条形码基因标准点的PCR扩增引物作为条形码引物,其中n≥1;其中,所述条形码引物PCR扩增片段毛细电泳分离结果需满足以下条件:所述条形码引物PCR扩增片段在毛细电泳分离结果出现的位置、个数具有不同组合,该位置-个数组合赋予唯一编码值,并且所述编码值与待区分的多重基因检测方案的多重基因检测试剂盒一一对应;
步骤2,根据所述编码值与待区分的多重基因检测方案的多重基因检测试剂盒一一对应的关系,建立编码值-试剂盒对照表;
步骤3,将一个组合的条形码引物按一定的稀释比例放入相应的多重基因检测试剂盒的引物管中,与多重基因检测试剂盒的检测试剂及样品进行同步PCR扩增和毛细电泳分离;
步骤4,分析毛细电泳检测数据,根据条形码基因标准点以及各条形码引物基因扩增片段在毛细电泳分离结果出现的位置、个数,参照所述步骤2建立的编码值-试剂盒对照表,便得到了该检测试剂所属的试剂盒。
2.根据权利要求1所述的一种区分多重基因检测方案的方法,其特征在于,所述条形码基因标准点需要满足以下条件:(1)n个条形码基因标准点所在的空间,在所有待编码多重基因检测试剂盒所涉及的分子片段大小所在区间之外的公共区域中产生;(2)相邻条形码基因标准点的位置间隔相差≥3个核苷酸。
3.用于确定多重基因检测方案的条形码引物组,其特征在于,所述条形码引物组是至少一对条形码引物的组合;所述条形码引物是针对n个条形码基因标准点的位置对应设计的n对PCR扩增引物;假定待区分的多重基因检测方案的种类个数为M,选取的条形码基因标准点的总个数n满足如下公式:
其中,所述多重基因检测方案是指使用多重基因检测试剂盒检测样品;所述条形码基因标准点需要满足以下条件:(1)n个条形码基因标准点所在的空间,在所有待区分的多重基因检测试剂盒所涉及的分子片段大小所在区间之外的公共区域中产生;(2)相邻条形码基因标准点的位置间隔相差≥3个核苷酸;
并且,所述条形码引物组的PCR扩增片段在毛细电泳分离结果出现的位置、个数具有不同组合,该位置-个数组合赋予唯一编码值,并且所述编码值与待区分的多重基因检测方案的多重基因检测试剂盒一一对应。
4.试剂盒条形码系统,其特征在于,包括M个多重基因检测试剂盒;其中每个多重基因检测试剂盒包含权利要求3所述的用于确定多重基因检测方案的条形码引物组。
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