[发明专利]一种注射用乌头提取物的制备方法

权利要求书

1.一种注射用乌头提取物的制备方法，其特征在于，其具体步骤为：

(1)超声提取：将乌头药材粉碎后加入乙醇水溶液超声提取两次，合并两次提取液，蒸至无醇味；

(2)有机相萃取：直接向步骤(1)所得的提取液中加水补充至固体充分溶解，滴加氨水调碱性；加入有机溶剂萃取，合并有机相溶液蒸干；

(3)反相色谱纯化：将步骤(2)所得的固体残余物加入有机溶剂和水的混合溶液重溶，进行反相色谱纯化；上样量与填料的质量比为1∶30～1∶100；依次用洗脱液进行三次梯度洗脱，每次洗脱体积为2～4倍柱体积；取第二次洗脱液减压浓缩，得到生物碱组分；

(4)水解炮制：直接向步骤(3)所得的生物碱组分中加水，超声至固体完全溶解，滴加氨水调碱性，回流煮沸，冷却，冷冻干燥得到注射用乌头提取物。

2.如权利要求1所述的一种注射用乌头提取物的制备方法，其特征在于，在所述的步骤(1)中，所述的乙醇水溶液的体积浓度为75～100％，用量为6～10倍量(w∶v)；

所述的提取时间为每次1～3小时。

3.如权利要求1所述的一种注射用乌头提取物的制备方法，其特征在于，在所述的步骤(2)中，所述的碱性条件为pH8～10，有机溶剂为乙酸乙酯，环己烷，二氯甲烷中的一种；

所述的有机相与水相体积比为1∶1～1∶1.5，萃取2～4次。

4.如权利要求1所述的一种注射用乌头提取物的制备方法，其特征在于，在所述的步骤(3)中，所述的有机溶剂可为甲醇、乙醇或者乙腈中的一种。

5.如权利要求1所述的一种注射用乌头提取物的制备方法，其特征在于，在所述的步骤(3)中，所述的洗脱液有机相的体积分数为第一次10％～20％，第二次20％～60％，第三次100％。

6.如权利要求1所述的一种注射用乌头提取物的制备方法，其特征在于，在所述的步骤(3)中，所述的反相色谱填料粒径为5～60μm。

7.如权利要求1所述的一种注射用乌头提取物的制备方法，其特征在于，在所述的步骤(4)中，所述的水溶液用量为400～600倍量(w∶v)。

8.如权利要求1所述的一种注射用乌头提取物的制备方法，其特征在于，在所述的步骤(4)中，所述的水解炮制碱性条件为pH8～10。

9.如权利要求1所述的一种注射用乌头提取物的制备方法，其特征在于，在所述的步骤(4)中，所述的水解温度为60～100℃恒温环境，水解时间为20min～3h。

10.如权利要求1所述的一种注射用乌头提取物的制备方法，其特征在于，在所述的步骤(4)中，所述的注射用乌头提取物采用外标法，测得单酯型生物碱含量以苯甲酰乌头碱，苯甲酰中乌头碱和苯甲酰次乌头碱的总量计大于20％，双酯型生物碱含量以乌头碱，中乌头碱和次乌头碱的总量计小于4％。另有水解生成的胺醇型生物碱和中间产物焦乌头碱。