[发明专利]间充质干细胞体外传代基因组稳定性检测方法在审
| 申请号： | 201410025142.3 | 申请日： | 2014-01-20 |
| 公开（公告）号： | CN103789424A | 公开（公告）日： | 2014-05-14 |
| 发明（设计）人： | 王有为;韩之波 | 申请（专利权）人： | 北京汉氏联合生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京国帆知识产权代理事务所(普通合伙) 11334 | 代理人： | 李增朝 |
| 地址： | 100176 北京市大兴区北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 间充质 干细胞 体外 传代 基因组 稳定性 检测 方法 | ||
1.一种检测间充质干细胞体外传代遗传稳定性的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）原代分离间充质干细胞；（2）对原代分离的间充质干细胞进行短期传代，并冻存建库；（3）对间充质干细胞进行长期传代（4）提取低代次和高代次的间充质干细胞之基因组DNA；（5）采用高通量的生物芯片或测序技术，比较高代次和低代次间充质干细胞基因组DNA的差异；（6）基于高通量分析结果，对低代次的间充质干细胞基因组体外传代稳定性做出评价。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2中短期传代为进行2-5次传代，传代比例为1:3-1:10。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2中将低代次细胞进行冻存，定义为低代次细胞库，待体外传代基因组稳定性检测合格后再用于临床治疗。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤3中长期传代为细胞传代比例为1:3-1:10，细胞的世代需要达到30个世代之后，定义为高代次的细胞。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的高通量检测技术包括aCGH、SNP芯片或全基因组测序。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，通过长期传代放大体外培养过程中间充质干细胞基因组发生的变化，利用高通量的检测手段，评价间充质干细胞体外传代过程中基因组稳定性，从而筛选出基因组更稳定、临床使用更安全的细胞。
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