[发明专利]H5N1禽流感病毒样颗粒及其应用和制备方法、疫苗无效
| 申请号： | 201410025271.2 | 申请日： | 2014-01-20 |
| 公开（公告）号： | CN103740655A | 公开（公告）日： | 2014-04-23 |
| 发明（设计）人： | 曲新勇;陈文彬 | 申请（专利权）人： | 瑞鑫百奥生物科技（深圳）有限公司 |
| 主分类号： | C12N7/01 | 分类号： | C12N7/01;C12N15/81;A61K39/145;A61P31/16;C12R1/93 |
| 代理公司： | 深圳市博锐专利事务所 44275 | 代理人： | 张明 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市福田*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | h5n1 禽流感 病毒 颗粒 及其 应用 制备 方法 疫苗 | ||
1.一种H5N1禽流感病毒样颗粒，其特征在于，其包含HA蛋白、NA蛋白和M2蛋白，所述HA蛋白的氨基酸序列为SEQ ID No：l，所述NA蛋白的氨基酸序列为SEQ ID No：3，所述M2蛋白的氨基酸序列为SEQ ID No：5。
2.根据权利要求1所述的H5N1禽流感病毒样颗粒，其特征在于，所述HA蛋白核苷酸序列为SEQ ID No:2，所述NA蛋白的核苷酸序列为SEQ ID No:4，所述M2蛋白的核苷酸序列为SEQ ID No:6。
3.含有权利要求1-2任一项所述H5N1禽流感病毒样颗粒的疫苗。
4.根据权利要求3所述的疫苗，其特征在于，所述疫苗为固态制剂、肌注或喷雾型液态制剂。
5.如权利要求1-2任一项所述H5N1禽流感病毒样颗粒的用途，用于制备预防禽流感病毒相关疾病的组合物。
6.一种如权利要求2所述的H5N1禽流感病毒样颗粒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将人工合成的禽流感病毒基因克隆到克隆载体中，所述禽流感病毒基因的核苷酸序列为SEQ ID No：3、SEQ ID No：4和SEQ ID No：6依次的组合，将克隆载体的禽流感病毒基因连入重组表达载体，将重组表达载体转入到酵母感受态细胞中进行发酵培养，培养后将培养物纯化即得H5N1禽流感病毒样颗粒。
7.根据权利要求6所述的H5N1禽流感病毒样颗粒的制备方法，其特征在于，所述克隆载体为PVD5质粒。
8.根据权利要求6所述的H5N1禽流感病毒样颗粒的制备方法，其特征在于，所述重组表达载为PTG3828质粒。
9.根据权利要求6所述的H5N1禽流感病毒样颗粒的制备方法，其特征在于，所述酵母感受态细胞为C13BYS86。
10.根据权利要求6所述的H5N1禽流感病毒样颗粒的制备方法，其特征在于，所述步骤“将重组表达载体转入到酵母感受态细胞中进行发酵培养，培养后将培养物纯化即得H5N1禽流感病毒样颗粒”具体为：将重组表达载体转染酵母感受态细胞C13BYS86，经30℃，72小时震荡培养饱和培养后，进行1分钟超声波裂解，3000rpm高速离心除细胞碎片，收集上清即为液态免疫原的H5N1禽流感病毒样颗粒。
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