[发明专利]用于增强T细胞应答的方法

说明书

本申请是国际申请号PCT/US2008/002044，国际申请日2008年2月15日，进入中国国家阶段日期为2009年10月15日，中国申请号200880012207.3，发明名称为“用于增强T细胞应答的方法”的分案申请。

对相关申请的交叉参考

本申请要求于2007年2月15日提交的美国临时申请系列号60/901,980的优先权，将其全文结合于此作为参考。

发明背景

本发明的实施方案涉及免疫学和疫苗开发领域。本文公开的本发明的实施方案涉及用于增强免疫和接种的方法和组合物。更具体地，本发明的实施方案涉及提高T细胞应答刺激的方法。本发明的一些实施方案具有作为在治疗疾病如传染病或癌症的接种策略中的进一步应用。

背景

活性减毒疫苗通常在一次注射后诱导强的和长期持续的免疫应答，并且许多这种类型的病毒疫苗具有超过90％的效力(Nossal，G.Vaccines in Fundamental Immunology(基础免疫学中的疫苗)(Paul，W.E.编辑)1387-1425；Lippincot-Raven出版商，费城，1999，将其全文结合于此作为参考)。与此相反，由杀死的微生物、毒素、包括肽疫苗的亚单位疫苗，或裸DNA疫苗组成的疫苗是相当较低效力的，并且加强免疫是必需的。尽管活疫苗产生激发强免疫应答的增加的抗原剂量，但是非复制性的疫苗产生减少的抗原模式，其如在本文实施例中所证实，是T细胞的相当弱的刺激物。

对于开发增强针对疾病的T细胞应答的免疫模型存在着持续的需要，所述疾病如，但不限于传染病或癌症。因此，本文公开的本发明的实施方案涉及包括在免疫过程中增加抗原性刺激的免疫治疗方法，其独立于累积的总抗原剂量，从而增强免疫原性。因此，本文公开的本发明的实施方案提供对目前免疫模型的修正并且提供用于设计并应用疫苗和免疫疗法的方法和组合物。

发明概述

本文公开的本发明的实施方案涉及最优化CD8⁺T细胞应答的方法和组合物。因此，本发明的一些实施方案涉及刺激哺乳动物中I类MHC-限制性T细胞应答的方法；所述方法包括向哺乳动物施用多个连续剂量的免疫原性组合物，其中在起始剂量后的每个剂量大于紧接其前的剂量。

在一些实施方案中，连续剂量作为起始剂量的线性函数增加。在另一个实施方案中，连续剂量作为起始剂量的指数函数增加。指数函数由≥2^n-1的指数因子限定。在另一些实施方案中，指数因子是5^n-1。

在一些实施方案中，所述免疫原性组合物包括免疫原加上免疫增强剂或生物反应调节剂。所述免疫增强剂或生物反应调节剂可以是例如，但不限于细胞因子，趋化因子PAMP，TLR-配体，免疫刺激序列，包含CpG的DNA，dsRNA，胞吞模式的识别受体(PRR)配体，LPS，皂树皂苷(quillaja saponin)，妥卡雷琐等。

多个剂量可以是2个或更多个剂量。在一些实施方案中，多个剂量包括2-6个剂量。在其他实施方案中，多个剂量包括多于6个剂量。在本发明的一些实施方案中，多个剂量可以受免疫原的半衰期(t_1/2)影响。例如，为了实现相似的结果，与具有相对较长半衰期的免疫原相比，具有相对较短半衰期的免疫原可需要更频繁的施用，并且因此需要更多数量的剂量。

在一些实施方案中，最后一次剂量可以在第一次剂量的6天内施用。在一些实施方案中，最后一次剂量可以在第一次剂量后的7，8，9，10或更多天内施用。

本发明的实施方案涉及这样的方法，其中与使用相同累积剂量而在剂量中没有随时间的线性或指数增加的免疫接种比较，获得了增强的应答。增强的应答可以包括增加数量的反应性T细胞。在一些实施方案中，增强的应答可以包括增加的免疫刺激细胞因子的产生。所述细胞因子可以是例如，IL-2或IFN-γ。在一些实施方案中，增强的应答可以包括细胞溶解活性的增加。在一些实施方案中，增强的应答可以包括免疫抑制细胞因子的峰值产生的延迟。免疫抑制细胞因子可以是，例如IL-10。

本发明的实施方案涉及这样的方法，所述方法通过直接递送到淋巴系统将免疫原性组合物施用于哺乳动物。例如，施用免疫原性组合物至哺乳动物的方法可以通过节内递送进行。

在本发明的一些实施方案中，可以将免疫原性组合物经过皮下、肌内、皮内、透皮、透粘膜、鼻、支气管、口部、直肠等施用于哺乳动物。