[发明专利]疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶突变体、编码基因及其应用

权利要求书

1.一种疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶突变体，由序列如下的肽段经点突变获得：RPVRRAVPQD LLDQFELFSQ YSAAAYCAAN NHAPVGSDVT CSENVCPEVD AADATFLYSF EDSGLGDVTG LLALDNTNKL IVLSFRGTRS VENWIANLNA DLTEISDICS GCEGHDGFVT SWRSVADTIR EQVQNAVNEH PDYRVVFTGH SLGGALATIA AAALRGNGYN IDVFSYGAPR VGNRAFAEFL TAQTGGTLYR ITHTNDIVPR LPPRDWGYSH SSPEYWVTSG NDVPVTANDI TVVEGIDSTD GNNQGNIPDI PSHLWYFGPI SECD；所述的点突变为下列之一或两者结合：（1）第63位的S突变为L或M；（2）第232位的D突变为A。

2.如权利要求1所述的疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶突变体，其特征在于所述嗜热丝孢菌脂肪酶突变体序列如下：RPVRRAVPQD LLDQFELFSQ YSAAAYCAAN NHAPVGSDVT CSENVCPEVD AADATFLYSF EDLGLGDVTG LLALDNTNKL IVLSFRGTRS VENWIANLNA DLTEISDICS GCEGHDGFVT SWRSVADTIR EQVQNAVNEH PDYRVVFTGH SLGGALATIA AAALRGNGYN IDVFSYGAPR VGNRAFAEFL TAQTGGTLYR ITHTNDIVPR LPPRDWGYSH SSPEYWVTSG NAVPVTANDI TVVEGIDSTD GNNQGNIPDI PSHLWYFGPI SECD。

3.如权利要求1所述的疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶突变体，其特征在于所述嗜热丝孢菌脂肪酶突变体序列如下：RPVRRAVPQD LLDQFELFSQ YSAAAYCAAN NHAPVGSDVT CSENVCPEVD AADATFLYSF EDLGLGDVTG LLALDNTNKL IVLSFRGTRS VENWIANLNA DLTEISDICS GCEGHDGFVT SWRSVADTIR EQVQNAVNEH PDYRVVFTGH SLGGALATIA AAALRGNGYN IDVFSYGAPR VGNRAFAEFL TAQTGGTLYR ITHTNDIVPR LPPRDWGYSH SSPEYWVTSG NDVPVTANDI TVVEGIDSTD GNNQGNIPDI PSHLWYFGPI SECD。

4.如权利要求1所述的疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶突变体，其特征在于所述嗜热丝孢菌脂肪酶突变体序列如下：RPVRRAVPQD LLDQFELFSQ YSAAAYCAAN NHAPVGSDVT CSENVCPEVD AADATFLYSF EDMGLGDVTG LLALDNTNKL IVLSFRGTRS VENWIANLNA DLTEISDICS GCEGHDGFVT SWRSVADTIR EQVQNAVNEH PDYRVVFTGH SLGGALATIA AAALRGNGYN IDVFSYGAPR VGNRAFAEFL TAQTGGTLYR ITHTNDIVPR LPPRDWGYSH SSPEYWVTSG NAVPVTANDI TVVEGIDSTD GNNQGNIPDI PSHLWYFGPI SECD。

5.编码权利要求1～4之一所述疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶突变体的基因。

6.如权利要求5所述的基因，其特征在于所述基因为下列之一：SEQ ID NO.4，SEQ ID NO.6，SEQ ID NO.8。

7.如权利要求1所述的疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶突变体在水解外消旋2-羧乙基-3-氰基-5-甲基己酸乙酯制备普瑞巴林关键手性中间体(3S)-2-羧乙基-3-氰基-5-甲基己酸中的应用。