[发明专利]清凉油含量测定方法

权利要求书

1.一种清凉油含量测定方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）设备和材料的准备

①色谱条件

色谱柱：HP-INNOWAX毛细管柱，其规格为60m×0.25mm，0.25μm，检测器：氢火焰离子化检测器，检测器温度：250-300℃、进样口温度：220-270℃，柱温：程序升温，初始温度60-110℃，升至220-280℃，每分钟5-15℃，保持8-20min，进样方式：分流进样，分流比20:1；

②对照品溶液的制备

精密称取薄荷脑、樟脑、桉油精和丁香酚对照品适量，精密称定，加试剂分别制成每1ml含薄荷脑1.0-1.6mg、樟脑1.1-1.8mg、桉油精0.8-1.2mg和丁香酚0.2-0.6mg的混合对照品溶液；

③供试品溶液的制备

取清凉油适量，混匀，取0.2g，精密称定，置25ml量瓶中，加入试剂10ml，在50℃水浴上加热数分钟使融化，放冷，定容，摇匀，离心，取上清液，即得；

（2）样品含量测定

分别取对照品溶液和供试品溶液，注入气相色谱仪，记录峰面积，按外标法分别计算清凉油中桉油精、樟脑、薄荷脑和丁香酚含量。

2.根据权利要求1所述的清凉油含量测定方法，其特征在于：所述的对照品溶液和供试品溶液制备采用的试剂是指30-60℃石油醚、60-90℃石油醚、90-120℃石油醚、正己烷、正戊烷和环己烷中的一种。

3.根据权利要求1所述的清凉油含量测定方法，其特征在于：还包括步骤（2）测试方法的方法学考察项目，包括：专属性试验、耐用性试验、线性关系、精密度试验、稳定性试验、检测限、重复性试验、加样回收率试验。

4.根据权利要求1所述的清凉油含量测定方法，其特征在于：所述专属性试验：按照上述色谱条件，吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液，分别注入气相色谱仪，理论板数按樟脑计算大于300000，分离度均大于2；表明阴性对照溶液中的组分不干扰相应对照品的测定。

5.根据权利要求1所述的清凉油含量测定方法，其特征在于：所述耐用性试验：试验考察了不同色谱柱即HP-5MS毛细管柱，固定相是(5%-苯基)-甲基聚硅氧烷，0.25mm和0.32mm，0.25μm，30m，和HP-INNOWAX毛细管柱，固定相是聚乙二醇PEG，60m×0.25mm，0.25μm，结果发现HP-INNOWAX毛细管柱比较适合此4种成分的分析检测；另外，对参数进样口温度、检测器温度、程序升温速度、流速进行了比较，发现微调条件，4种成分的色谱峰理论塔板数、分离度、拖尾因子均较好。

6.根据权利要求1所述的清凉油含量测定方法，其特征在于：所述线性关系：按上述色谱条件测定，以对照品峰面积的积分值A为纵坐标Y，进样量C（μg）为横坐标X，进行线性回归，薄荷脑、樟脑、桉油精和丁香酚在相应范围内均呈良好的线性关系。

7.根据权利要求1所述的清凉油含量测定方法，其特征在于：所述稳定性试验：4种对照品溶液在24h内RSD均小于2%，稳定性较好。

8.根据权利要求1所述的清凉油含量测定方法，其特征在于：所述检测限：采用信噪比法，得到薄荷脑、樟脑、桉油精和丁香酚对照品的最低检测限浓度。

9.根据权利要求1所述的清凉油含量测定方法，其特征在于：所述重复性试验：4种成分的平均含量RSD均<1%，重复性较好。

10.根据权利要求1所述的清凉油含量测定方法，其特征在于：所述加样回收率试验：4种成分的平均加样回收率均符合要求，RSD均<2%。