[发明专利]清凉油含量测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及清凉油的含量测定方法，具体涉及一种清凉油中薄荷脑、樟脑、桉油精和丁香酚的含量测定方法。

背景技术

清凉油是由薄荷脑、樟脑、桉油、丁香油等原料组成的非处方药，具有清凉散热，醒脑提神，止痒止痛之功，主要用于感冒头痛，中暑，晕车，蚊虫蜇咬等。由于药效显著，且药用范围广泛而沿用至今，为广大消费者所青睐。

目前，清凉油国内有38家医药企业生产该产品，批准文号有41个，另外市场中还有妆字号清凉类产品，规格品牌均较多。作为国药准字号，清凉油的质量标准是卫生部颁中药标准（WS3-B-0144-89），其中主要检测指标有鉴别、熔点、含量测定、装量差异，其中含量测定指检测其中总挥发油量。到目前为止，未见有关清凉油中相关成分的研究报道，无该复方中薄荷脑、樟脑、桉油精和丁香酚的测定方法。

按照中药质量标准分析方法验证指导原则（2010年中国药典一部）等相关要求，建立清凉油中薄荷脑、樟脑、桉油精和丁香酚的含量测定方法（气相色谱法），分别进行了方法学考察，具体包括专属性试验、耐用性试验、线性关系、精密度试验、稳定性试验、检测限、重复性试验、加样回收率试验。确定的色谱条件为：色谱柱：HP-INNOWAX毛细管柱（60m×0.25mm，0.25μm），检测器：氢火焰离子化检测器，检测器温度：250-300℃，进样口温度：220-270℃，柱温：程序升温，初始温度60-110℃，升至220-280℃，每分钟5-15℃，保持8-20min，进样方式：分流进样，分流比20:1。该方法科学合理，简便易行，适用于清凉油中的薄荷脑、樟脑等挥发性成分及其相关提取物的质量控制。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种清凉油中挥发性类成分的含量测定方法，以克服现有技术所存在的上述缺点和不足。

本发明所需要解决的技术问题，可以通过以下技术方案来实现：

清凉油含量测定方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）设备和材料的准备

①色谱条件

色谱柱：HP-INNOWAX毛细管柱，其规格为60m×0.25mm，0.25μm，检测器：氢火焰离子化检测器，检测器温度：250-300℃，进样口温度：220-270℃，柱温：程序升温，初始温度60-110℃，升至220-280℃，每分钟5-15℃，保持8-20min，进样方式：分流进样，分流比20:1。

②对照品溶液的制备

精密称取薄荷脑、樟脑、桉油精和丁香酚对照品适量，精密称定，加试剂分别制成每1ml含薄荷脑1.0-1.6mg、樟脑1.1-1.8mg、桉油精0.8-1.2mg和丁香酚0.2-0.6mg的混合对照品溶液。

③供试品溶液的制备

取清凉油适量，混匀，取0.2g，精密称定，置25ml量瓶中，加入试剂10ml，在50℃水浴上加热数分钟使融化，放冷，定容，摇匀，离心，取上清液，即得。

（2）样品含量测定

分别取对照品溶液和供试品溶液，注入气相色谱仪，记录峰面积，按外标法分别计算清凉油中桉油精、樟脑、薄荷脑和丁香酚含量。

（3）方法学考察项目包括：专属性试验、耐用性试验、线性关系、精密度试验、稳定性试验、检测限、重复性试验、加样回收率试验。

①专属性试验

按照上述色谱条件，吸取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液，分别注入气相色谱仪，理论板数按樟脑计算大于300000，分离度均大于2；表明阴性对照溶液中的组分不干扰相应对照品的测定。

②耐用性试验

本发明考察了不同色谱柱即HP-5MS毛细管柱，固定相是(5%-苯基)-甲基聚硅氧烷，0.25mm和0.32mm，0.25μm，30m，和HP-INNOWAX毛细管柱，固定相是聚乙二醇（PEG），60m×0.25mm，0.25μm，结果发现HP-INNOWAX毛细管柱比较适合此4种成分的分析检测；

另外，对参数进样口温度、检测器温度、程序升温速度、流速进行了比较，发现微调条件，4种成分的色谱峰理论塔板数、分离度、拖尾因子均较好。

③线性关系

分别将低浓度对照品溶液1μl，中浓度对照品溶液1、2μl，高浓度对照品溶液注入气相色谱仪。