[发明专利]一种细菌对抗生素敏感性的鉴定方法及其设备无效
申请号: | 201410038130.4 | 申请日: | 2014-01-26 |
公开(公告)号: | CN103725747A | 公开(公告)日: | 2014-04-16 |
发明(设计)人: | 佟雪梅 | 申请(专利权)人: | 佟雪梅 |
主分类号: | C12Q1/04 | 分类号: | C12Q1/04;C12M1/34 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 吴开磊 |
地址: | 100020 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 细菌 抗生素 敏感性 鉴定 方法 及其 设备 | ||
1.一种细菌对抗生素敏感性的鉴定方法,其特征在于,包括下列步骤:
(a)分别取多个同一菌种的已知对某一抗生素敏感、中度敏感和具有耐药性的菌株,分别对其进行抗生素诱导;
(b)分别将诱导后的菌株进行细胞内代谢产物的提取;
(c)分别对提取的细胞内代谢产物进行质谱分析,得到敏感菌质谱图,中敏菌质谱图和耐药菌质谱图;
(d)分别将敏感菌质谱图,中敏菌质谱图和耐药菌质谱图所含有的信息转化为特征峰形式;
(e)将特征峰形式对应的代谢物波峰值进行聚类分析,分别得到敏感、中度敏感和具有耐药性的菌株的聚类图谱,去掉分类错误的菌株,将三者的数据进行保存得到数据库;
(f)取相同菌种的待测菌,重复步骤(a)-(d),将待测菌的代谢物波峰值与已得到的数据库合并,以相关度作为聚类参数进行分类,得到待测菌在聚类图谱中的位置,由此得到待测菌的抗生素敏感性。
2.根据权利要求1所述的一种细菌对抗生素敏感性的鉴定方法,其特征在于,所述同一菌种取自肠杆菌科、微球菌科、假单胞菌科、伯克氏菌科、李斯特菌科或链球菌科。
3.根据权利要求2所述的一种细菌对抗生素敏感性的鉴定方法,其特征在于,所述肠杆菌科包括不动杆菌属、柠檬酸杆菌属、肠杆菌属、埃希氏菌属、克雷伯氏菌属、摩根菌属、苍白杆菌属、巴氏杆菌属、变形杆菌属、沙门氏菌属和沙雷氏菌属;
所述微球菌科包括葡萄球菌属;
所述假单胞菌科包括假单胞菌属;
所述伯克氏菌科包括伯克氏菌属;
所述李斯特菌科包括李斯特菌属;
所述链球菌科包括肠球菌属和链球菌属。
4.根据权利要求1所述的一种细菌对抗生素敏感性的鉴定方法,其特征在于,在所述步骤(a)中,所述抗生素诱导采用CLSI推荐的步骤进行。
5.根据权利要求4所述的一种细菌对抗生素敏感性的鉴定方法,其特征在于,在步骤(a)中,诱导时间为4-6h。
6.根据权利要求4所述的一种细菌对抗生素敏感性的鉴定方法,其特征在于,在步骤(a)中,诱导时间为4h。
7.根据权利要求1所述的一种细菌对抗生素敏感性的鉴定方法,其特征在于,在所述步骤(b)中,细胞内代谢产物的提取采用甲醇-氯仿法。
8.根据权利要求1所述的一种细菌对抗生素敏感性的鉴定方法,其特征在于,在所述步骤(e)中,进行所述聚类分析时,分类数量选择为3-8。
9.一种用于实施权利要求1-8任意一项所述的细菌对抗生素敏感性的鉴定方法的设备,其特征在于,包括:进样系统、分离系统、质谱系统、数据分析系统和报告系统;
所述进样系统为放置样品的部位;
所述分离系统将代谢提取物成分分开;
所述质谱系统对所述分开的代谢提取物成分进行质谱检测,得到质谱图;
所述数据分析系统将质谱图信息转化为特征峰形式的数据并获取数据库的信息对样品进行聚类定位;
所述报告系统是将样品聚类定位的信息输出。
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