[发明专利]从蛹虫草中提取虫草素组分的方法及其应用

权利要求书

1.一种从蛹虫草中提取虫草素组分的方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）取烘干的蛹虫草子实体为原料，放入超微粉碎机中进行超微粉碎，得到超微粉；

（2）将超微粉用超纯水进行水煮提取，离心，取上清液干燥至固状，然后用乙醇进行醇沉处理，离心，收集醇沉上清液，将醇沉上清液旋蒸后干燥至固状，得到粗提物；

（3）将粗提物用15%甲醇-水溶液溶解至100mg/mL，经制备液相DAC反相色谱柱进行分离，反相分离填料为C18，洗脱方式为先用5%-15%甲醇-水溶液梯度洗脱、再用15%甲醇-水溶液等度洗脱，检测波长260nm，得到各组分经体外抗肿瘤活性筛选后，选取活性最强的组分旋蒸浓缩后真空干燥，即得到本发明目的虫草素组分。

2.根据权利要求1所述的从蛹虫草中提取虫草素组分的方法，其特征在于：所述步骤（1）中超微粉碎具体步骤为每次称取100～200g蛹虫草子实体，放入超微粉碎机中粉碎超微粉碎1min，同时粉碎全过程用-15～-20℃的水作为超微破碎机内部冷却液。

3.根据权利要求1所述的从蛹虫草中提取虫草素组分的方法，其特征在于：所述步骤（2）中超微粉与超纯水按料液比1︰8进行混合均匀，水煮时间为30～90min，提取三次。

4.根据权利要求1所述的从蛹虫草中提取虫草素组分的方法，其特征在于：所述步骤（2）中用乙醇进行醇沉处理具体步骤为先按料液比（1～4）︰1加超纯水溶解，然后加入95%的乙醇至终浓度为80%，充分混匀后，4℃醇沉过夜。

5.根据权利要求1所述的从蛹虫草中提取虫草素组分的方法，其特征在于：所述步骤（3）中反相分离填料C18中硅球粒径为10μm，DAC反相色谱柱直径为50mm、柱长为250mm，流速为80mL/min，进样量为20mL，洗脱方式为先用5%-15%甲醇-水溶液梯度洗脱10min、再用15%甲醇-水溶液等度洗脱30min。

6.根据权利要求1所述的从蛹虫草中提取虫草素组分的方法，其特征在于：所述步骤（3）中体外抗肿瘤活性筛选具体是指进行抑制人肺癌A549细胞生长试验和抑制人肝癌Hep-G2细胞生长试验。

7.权利要求1所述的从蛹虫草中提取得到的虫草素组分在制备抗肿瘤药物中的应用。