[发明专利]寡肽CD01及其制备方法和应用有效
申请号: | 201410044246.9 | 申请日: | 2014-01-30 |
公开(公告)号: | CN104817618B | 公开(公告)日: | 2018-07-03 |
发明(设计)人: | 陈光健 | 申请(专利权)人: | 陈光健 |
主分类号: | C07K5/087 | 分类号: | C07K5/087;C07K1/06;C07K1/04;A61K38/05;A61P29/00;A61P17/02;A61P1/04;A61P37/04;A23L33/18 |
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地址: | 620500 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 寡肽 制备方法和应用 制备 氨基酸序列 小分子寡肽 创面修复 基因工程 抗炎镇痛 制备寡肽 治疗效果 合成 治疗 | ||
1.一种寡肽CD01,其特征在于,由Y、E、H 3个氨基酸残基组成,分子量为447.45 Da,其氨基酸序列如SEQ ID:1 所示,所述寡肽的制备方法,包括如下步骤:
a.合成顺序为从C端到N端;取1倍摩尔当量的树脂放入多肽合成仪反应器中,加入DCM(二氯甲烷)溶胀半小时,然后抽掉DCM,加入序列中第一个Fmoc保护的氨基酸10mmol,2倍摩尔当量的DIEA(二异丙基乙胺),加入DMF(二甲基甲酰胺)和DCM溶液,以可使树脂充分鼓动起来为宜,用氮气鼓泡反应60min;然后加入5倍摩尔当量甲醇,反应半小时,抽掉反应液,用DMF、甲醇洗净;
b.加入适量哌啶去除Fmoc(9-芴甲氧羰基)保护基,洗净,茚三酮检测;
c.往反应器中加入2倍摩尔当量序列中的第二个氨基酸,2倍摩尔当量HBTU(苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐)及DIEA,氮气鼓泡反应半小时,抽掉液体,用DMF,甲醇洗净,茚三酮检测;
d.重复依步骤b、c的方式依次加入序列中氨基酸,抽掉液体,用DMF洗净,茚三酮检测;
e.将树脂用氮气吹干后,从反应柱中取下并称取重量,倒入烧瓶中,然后往烧瓶中加一定量的95%TFA(三氟乙酸)切割液,震荡反应2 h,目的是将多肽从树脂载体上裂解下来并去除氨基酸的侧链保护基团;
f.滤掉树脂,得到滤液,然后向滤液中加入大量乙醚,析出粗产物,然后离心,清洗即可得到该序列的粗产物;
g.分析提纯和质谱检测:用ESI(电喷雾电离)离子源质谱仪检测该序列分子量的正确性,用高效液相色谱将粗品提纯至要求纯度;
h.收集纯化好的目标寡肽溶液放入冻干机中进行浓缩,冻干成白色粉末。
2. 一种如权利要求1 所述的寡肽在制备抗炎或镇痛药物中的应用。
3. 一种如权利要求1 所述的寡肽在制备修复创面药物中的应用。
4. 一种如权利要求1 所述的寡肽在制备治疗皮肤外伤药物中的应用。
5. 一种如权利要求1 所述的寡肽在制备治疗消化道溃疡药物中的应用。
6. 一种如权利要求1 所述的寡肽在制备提高免疫力药物中的应用。
7.根据权利要求1所述的寡肽,其特征在于,所述的寡肽可作为普通食品、保健品或者药品的组成部分。
8.含有权利要求1所述的一种或多种寡肽的组合物,其中含有药学可以接受的载体。
9.根据权利要求8所述的组合物,其特征在于所述的组合物以药物制剂形式存在,将药物活性成分,本发明的寡肽与药物载体混合,按照制剂学常规技术制成所需要的剂型。
10.根据权利要求8所述的组合物,其特征在于所述的组合物的剂型为冷冻干燥注射剂。
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