[发明专利]寡肽CD01及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一个小分子寡肽及其制备方法，具体是寡肽CD01及其制备方法和应用,本发明公开了寡肽的氨基酸序列如SEQ ID:1所示，可以采用合成，提取或者基因工程等方式制备寡肽CD01，在制备治疗抗炎镇痛、创面修复以及提高免疫的药物中有较好的治疗效果。

技术领域

本发明属于蛋白质领域，特别涉及寡肽及其应用。

背景技术

寡肽是多肽的一种分类，分子量段一般在1000道尔顿以下,也称作小肽,一般由2--6个氨基酸组成。与其他肽的区别是，寡肽在人体不需消化，即可直接吸收。

炎症是具有血管系统的活体组织对损伤因子所发生的防御反应。对机体的损伤的局部组织所呈现的反应称为炎症反应，炎症发展后期会产生渗出液，渗出物的压迫和炎症介质的作用可引起患者疼痛。现在抗炎的临床应用药物主要为化学合成药物,如萘丁美酮、吲哚美辛、吡罗昔康、布洛芬等,这些化学药物虽然抗炎效果明显,但不能治本,不能消除致炎的基本原因,大多都有较严重的不良反应，给患者造成痛苦和损失。

创面修复，创面是正常皮肤（组织）在外界致伤因子如外科手术、外力、热、电流、化学物质、低温以及机体内在因素如局部血液供应障碍等作用下所导致的损害。常伴有皮肤完整性的破坏以及一定量正常组织的丢失，同时，皮肤的正常功能受损。也称为伤口或者创伤。创面修复既伤口修复。

消化道溃疡病，胃溃疡、十二指肠溃疡统称为消化道溃疡病。由于生活节奏加快，工作压力加大，近年消化道溃疡病的发病率不仅未见下降，反有上升趋势。近10多年来本病的症状也变得不典型，无规律的胃部隐痛常引不起人们的注意，直到发生呕血或黑便时方到医院就诊。消化性溃疡主要指发生在胃和十二指肠的慢性溃疡，亦可发生于食管下段、胃空肠吻合口周围及含有异位胃粘膜的美克尔（MECKEL）憩室。这些溃疡的形成与胃酸和胃蛋白酶的消化作用有关，故称消化性溃疡。近年研究发现溃疡的形成与幽门螺旋桿菌（ＨＰ）的存在有关。本病绝大多数（95％以上）位于胃和十二指肠，故又称胃十二指肠溃疡。本病的总发病率占人口的5-10％，十二指肠溃疡较胃溃疡多见，以青壮年多发，男多于女，儿童亦可发病，老年患者所占比例亦逐年有所增。由于复发率很高，给患者带来痛苦。

免疫力是人体自身的防御机制，是人体识别和消灭外来侵入的任何异物（病毒、细菌等）；处理衰老、损伤、死亡、变性的自身细胞以及识别和处理体内突变细胞和病毒感染细胞的能力。现代免疫学认为，免疫力是人体识别和排除“异己”的生理反应。年老体弱的人员由于自身免疫系统较弱，所以需要提高细胞的识别能力。免疫力低下是会造成人体容易受到外界的感染，功能下降。

发明内容

为了寻找一种可以多角度保护人体创面和抗炎镇痛，同时提高人体免机能的药物，发明人通过大量合成试验，广泛的筛选，采用Fmoc保护的氨基酸来合成，得到大量寡肽分子，其中部分寡肽分子获得了意想不到的技术效果。意外地发现治疗效果较好的寡肽CD01，其由Y、E、H3个氨基酸残基组成，分子量为447.45Da，其氨基酸序列如SEQ ID:1所示。

上述寡肽的制备方法可以使用合成，也可以采用从生物体中提取纯化得到。寡肽的制备方法，其特征在于包括如下的步骤：

a.合成顺序为从C端到N端;取1倍摩尔当量的树脂放入多肽合成仪反应器中，加入DCM(二氯甲烷)溶胀半小时，然后抽掉DCM，加入序列中第一个Fmoc保护的氨基酸10mmol，2倍摩尔当量的DIEA(二异丙基乙胺)，适量的DMF(二甲基甲酰胺)、DCM溶液（适量是指以可使树脂充分鼓动起来为宜），用氮气鼓泡反应60min；然后加入约5倍摩尔当量甲醇，反应半小时，抽掉反应液，用DMF、甲醇洗净;

b.加入适量哌啶去除Fmoc（9-芴甲氧羰基）保护基，洗净，茚三酮检测；

c.往反应器中加入序列中第二个氨基酸（也为2倍摩尔当量），2倍摩尔当量HBTU（苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐）及DIEA，氮气鼓泡反应半小时，抽掉液体，用DMF,甲醇洗净，茚三酮检测;