[发明专利]马铃薯腐烂茎线虫快速PCR分子检测方法及其应用有效
| 申请号： | 201410050457.3 | 申请日： | 2014-02-13 |
| 公开（公告）号： | CN103740857A | 公开（公告）日： | 2014-04-23 |
| 发明（设计）人： | 彭德良;彭焕;贺文婷 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院植物保护研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京兆君联合知识产权代理事务所(普通合伙) 11333 | 代理人： | 胡敬红 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 马铃薯 腐烂 线虫 快速 pcr 分子 检测 方法 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.马铃薯腐烂茎线虫快速PCR分子检测方法，包括PCR反应体系，其特征在于所述PCR反应体系中有一组特异性引物，所述特异性引物为DdF1和DdR1，
DdF1:5’-GCTCTGTGCCTGGCTAATTTGTG-3’，
DdR1:5’-ACCAAACACTGGACAGCATTATC-3’。
2.根据权利要求1所述的分子检测方法，所述PCR反应体系中还含有通用引物D2A和D3B，
D2A:5’-ACAAGTACCGTGAGGGAAAGTTG-3’，
D3B:5’-TCGGAAGGAACCAGCTACTA-3’。
3.根据权利要求1所述的分子检测方法，所述的PCR反应体系为2.5μl的10×PCR含Mg2+的Buffer；2μl10mM dNTP；1.5μl引物对DdF1/DdR1；0.2μl Taq DNA聚合酶；2μl模板DNA；灭菌ddH2O补足至25μl。
4.根据权利要求3所述的分子检测方法，其中PCR反应条件为95℃预变性8min，95℃，45s，55℃，30s，72℃，1min，35个循环；72℃，10min，4℃保存。
5.权利要求1-4任一马铃薯腐烂茎线虫快速PCR分子检测方法在送检样本中是否带有马铃薯腐烂茎线虫及辅助鉴定中的应用。
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