[发明专利]一种新型双启动子结构单元在审
| 申请号： | 201410051605.3 | 申请日： | 2014-02-14 |
| 公开（公告）号： | CN104278032A | 公开（公告）日： | 2015-01-14 |
| 发明（设计）人： | 陈亮;王加龙 | 申请（专利权）人： | 上海美百瑞生物医药技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/79;C12N5/10;C12P21/00 |
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| 地址： | 201203 上海*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 新型 启动子 结构 单元 | ||
1.一种新型双启动子结构单元，其包含2个核酸序列如SEQ ID NO.2所示的CMV启动子和一段核酸序列如SEQ ID NO.1所示的序列，该双启动子结构单元在经染色体整合后使得表达系统中目的基因的转录或表达增加。
2.如权利要求1所述的新型双启动子结构单元，其特征在于所述新型双启动子结构单元为SEQ ID NO.3、或与SEQ ID NO.3互补的核苷酸序列。
3.一种真核表达载体，其特征在于其包含如权利要求1或2所述的新型双启动子结构单元。
4.一种真核宿主细胞，其特征在于其包含如权利要求3所述的真核表达载体。
5.如权利要求4所述的真核宿主细胞，其特征在于所述宿主细胞为哺乳动物细胞。
6.如权利要求5所述的真核宿主细胞，其特征在于所述哺乳动物细胞为CHO、NSO、Sp2/0-Ag14、BHK21、BHK TK′HaK、2254-62.2、V79、B14AF28-G3、或CHL细胞。
7.如权利要求6所述的真核宿主细胞，其特征在于所述CHO细胞为CHO-K1、CHO-DUKX，CHO-DUKX B1、CHO-DG44、或CHO Pro-5细胞。
8.一种形成经稳定转染的高产真核宿主细胞系的方法，其包括下列步骤：
(a)将如权利要求1或2所述的新型双启动子结构单元整合至包含目的基因的真核表达载体中；(b)用此表达载体转染真核宿主细胞；(c)选择经转染的高产宿主细胞。
9.一种制备重组蛋白药物的方法，包含下列步骤：(a)将如权利要求1或2所述的新型双启动子结构单元整合至包含目的基因的真核表达载体中；(b)用此表达载体转染真核宿主细胞；(c)选择经转染的高产宿主细胞；(d)在使得该一个或多个目的基因表达的条件下培养该所获得的经转染的高产宿主细胞；(e)收集并纯化目的蛋白质。
10.权利要求1或2所述的新型双启动子结构单元在制备药物或药物组合物中的用途。
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