[发明专利]一种用于评估穿心莲抗菌活性的方法

权利要求书

1.一种用于评估穿心莲抗菌活性的方法，所述方法以穿心莲抑菌率I%来评估穿心莲抗菌活性，所述I%根据以下的公式（1）来计算：

I%=（t₂–t₀）/t₀×100%   （1）

其中，t₀为在未经药物干预的细菌生长代谢热谱曲线中的第二指数生长期的达峰时间，t₂为在经穿心莲干预的细菌生长代谢热谱曲线中的第二指数生长期的达峰时间，其中干预细菌生长代谢的穿心莲供试品溶液的浓度在0.4～4mg/mL之间，优选地为3mg/mL。

2.根据权利要求1所述的方法，所述细菌为大肠杆菌、痢疾杆菌或绿脓杆菌，优选地为痢疾杆菌。

3.根据权利要求1所述的方法，其中，如下获得所述未经药物干预的细菌生长代谢热谱曲线：

将含有接种了细菌的培养基的安瓿瓶放入微量量热仪的样品池中，用微量量热仪来跟踪记录未经药物干预的细菌生长代谢过程中的热谱曲线,当热谱曲线再次回到基线时结束试验，即得到所述未经药物干预的细菌生长代谢热谱曲线。

4.根据权利要求1所述的方法，其中，如下获得经穿心莲干预的细菌生长代谢热谱曲线：

用培养细菌的培养基和穿心莲样品来配置所述穿心莲供试品溶液，用微孔滤膜过滤除菌，备用，优选地用0.22μm微孔滤膜过滤除菌；

将穿心莲供试品溶液和接种了细菌的培养基两者加入到安瓿瓶中并混匀，然后将所述安瓿瓶放入微量量热仪的样品池中，用微量量热仪来跟踪记录经穿心莲干预的细菌生长代谢过程中的热谱曲线，当热谱曲线再次回到基线时结束试验，即得到经穿心莲干预的细菌生长代谢热谱曲线。

5.根据权利要求3或4所述的方法，其中，用于获得未经药物干预的细菌生长代谢热谱曲线或经穿心莲干预的细菌生长代谢热谱曲线的细菌为培养至第3代至第5代的细菌，优选地为培养至第3代的细菌。

6.根据权利要求3或4所述的方法，其中，在所述接种了细菌的培养基中，细菌接种量为1×10⁵cells/mL、1×10⁶cells/mL或1×10⁷cells/mL，优选地为1×10⁶cells/mL。

7.根据权利要求4所述的方法，其中，穿心莲样品为穿心莲干浸膏。

8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述穿心莲干浸膏是用通过回流提取、超声提取或冷浸提取的滤液来制备的干浸膏；优选地，所述穿心莲干浸膏是用通过回流提取的滤液来制备的干浸膏。

9.根据权利要求4所述的方法，其中，所述穿心莲干浸膏通过以下来制备：

称取穿心莲全草，用水浸泡，回流提取，合并提取液并用滤纸过滤，滤液减压回收水，真空干燥，制得干浸膏；

其中，水优选地为去离子水或纯水；其中以毫升计的用于浸泡的水的体积优选地为以克计的穿心莲全草重量的5～10倍；优选地回流提取2次，每次回流的时间优选地为1.5小时至2小时。

10.根据权利要求4所述的方法，其中，所述接种了细菌的培养基和穿心莲供试品溶液的体积比为1:5～5:5，优选地为5:5。