[发明专利]载多西他赛和莱菔硫烷的自组装纳米粒的制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体的说，涉及制备载多西他赛（DTX）和莱菔硫烷（SFN）的PLGA-HA自组装纳米粒，靶向已分化的乳腺癌细胞和乳腺癌干细胞，以达到根治乳腺癌的目的。 

背景技术

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，在我国发病率有逐年上升的趋势，并且发病率趋于年轻化。因此，乳腺癌的预防和治疗成为我国医药研究的一项重要任务。目前乳腺癌的治疗已从单一的手术治疗发展到包括手术、化疗、放疗、生物治疗在内的综合疗法。这些方法主要表现为以下几个方面：(1)术后辅助化疗，这种疗法采用互不交叉耐药的多种化疗药物按时序和不同的药物组合进行联合治疗。旨在降低化疗药物的用药剂量、更好的控制药物剂量强度和剂量累计，从而降低化疗药物对正常组织的损伤。(2)术后辅助内分泌治疗，乳腺癌组织中雌激素暴露时间的延长会增加乳腺癌的危险性，基于这样的背景原因，减少或切断雌激素来源，或者设法抵抗雌激素的作用就有可能阻止雌激素对乳腺癌细胞的刺激，抑制乳腺癌的生长。(3)分子靶向治疗，这是基于乳腺癌细胞表面抗原、生长因子受体或细胞内信号转导通路中重要的酶或者蛋白质等的一种治疗方法。其中包括表皮生长因子受体靶向(如赫赛汀)、血管生成抑制因子(如贝伐单抗)以及表皮生长因子受体-酪氨酸酶抑制剂(如吉非替尼)。 

尽管，以上的综合疗法与单一的手术治疗、放疗、化疗相比取得了很大的进展，但是这些方法依旧面临着一些问题：(1)辅助化疗和内分泌治疗尽管降低了用药剂量，也减轻了对正常组织的损伤。临床上依旧采用的是全身给药，药物在肿瘤组织中的积累量仅仅是给药量的一小部分，并且药物在体内难以达到长循环的作用很快便代谢消除，需要对患者反复的给药，这对于肿瘤患者来说是雪上加霜。(2)分子靶向给药尽管在靶向性上有了提高，但是这种作用往往是针对乳腺癌病理过程中的某一个单一环节，对于不同的患者而言具有很大 的个体差异性。(3)目前的治疗方法存在一个共同问题：这些疗法中用于乳腺癌治疗的一线药物针对的都是已分化的肿瘤细胞，可以在较短时间内杀灭这类细胞，使肿瘤体积减小甚至消失，然而难以根除乳腺癌的复发，没有从根源上对乳腺癌进行治疗。 

随着人们对乳腺癌发生、发展机制的深入研究，近年来在干细胞学说的基础上提出了肿瘤干细胞(cancer stem cell，CSC)学说，该学说认为肿瘤干细胞是肿瘤发生的根源。CSC是存在于肿瘤组织中极小部分的未分化的细胞，这类细胞具很强的自我更新能力和分化潜能，并且能不断地产生新的肿瘤干细胞和肿瘤细胞，最新的研究表明乳腺癌干细胞细胞表型为CD44⁺CD24^-。传统的肿瘤治疗如手术切除、放疗、化疗均是针对整个肿瘤组织进行的，虽然消除了大多数的已分化肿瘤细胞，但由于CSC表达多种耐药蛋白如多药耐药蛋白-1，ATP结合盒蛋白等，导致其对化疗、放疗及其他的一些诱导凋亡的治疗不敏感。治疗后残余的CSC进一步增值分化形成新的肿瘤组织，导致肿瘤的复发。靶向肿瘤干细胞治疗为从本质上根除肿瘤提供了一条新的途径。 

多西他赛（DTX），是一线化疗药物，其主要的剂型为多西他赛注射液（商品名：泰索帝）,该产品不具备肿瘤靶向性，易产生骨髓抑制，皮肤红斑以及胃肠道反应。并且其溶剂为吐温-80，不实用于对吐温-80过敏的患者使用。另外，莱菔硫烷（SFN）是抗乳腺癌干细胞特异性的药物，但由于其体外对热和碱性条件的不稳定性以及体内的快速消除，其临床运用受到极大的限制。 

聚乳酸羟基乙酸（Poly(lactic-co-glycolic acid)，PLGA）由于具有良好的组织相容性和生物可降解性而广泛用于组织工程支架。透明质酸修饰的聚乳酸羟基乙酸共聚物（PLGA-b-HA）可主动结合乳腺癌及乳腺癌干细胞上高表达的CD44受体，从而介导纳米粒的主动靶向。 

目前尚无文献报道载多西他赛和莱菔硫烷的透明质酸修饰的聚乳酸羟基乙酸共聚物自组装纳米粒。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种载多西他赛和莱菔硫烷的透明质酸修饰的聚乳酸羟基乙酸共聚物自组装纳米粒的制备方法。本发明的另一个目的是提供上述方法制备得到的纳米粒，以及该纳米粒在制备治疗乳腺癌药物中的应用。 

本发明拟将多西他赛和莱菔硫烷联用同时消除分化的乳腺癌及乳腺癌干 细胞，以达到更好的治疗乳腺癌的目的。 

进一步地，本发明拟将多西他赛和莱菔硫烷两药包载于纳米粒中，利用PLGA-b-HA纳米粒对肿瘤组织的EPR效应以及主动靶向性，以达到提高疗效降低副作用的目的。