[发明专利]一种从红豆杉细胞培养生产的紫杉醇粗品中纯化紫杉醇的方法

权利要求书

1.一种从红豆杉细胞培养生产的紫杉醇粗品中纯化紫杉醇的方法，其特征在于，采用结晶析出法和正相柱层析法相结合的方法分离紫杉醇，首先，将从红豆杉细胞培养生产的紫杉醇粗品溶解在极性较大的有机溶媒中，使紫杉醇粗品与有机溶媒质量体积比在0.04-0.10 g/mL，然后逐滴加入反向有机溶媒，得到提纯的紫杉醇；然后再采用正相柱层析法进一步分离紫杉醇：固定相为200目～300目硅胶，流动相为二氯甲烷和乙酸乙酯或正己烷和丙酮的二元梯度混合溶剂；

所述的极性较大的有机溶媒选丁醇、丙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙酸丁脂或二氯甲烷；所述的反向有机溶媒为戊烷、异戊烷、正己烷、环己烷、异辛烷或石油醚。

2.如权利要求1所述的从红豆杉细胞培养生产的紫杉醇粗品中纯化紫杉醇的方法，其特征在于，初始时反向有机溶媒：有机溶媒的体积比=（10-30）：（90-70），最终时反向有机溶媒：有机溶媒体积比=（60-80）：（40-20）。

3.如权利要求1所述的从红豆杉细胞培养生产的紫杉醇粗品中纯化紫杉醇的方法，其特征在于，采用正相柱层析法分离紫杉醇时流动相采用二氯甲烷：乙酸乙酯体积比分别为3：1、2：1及1：1的二元梯度洗脱体系或采用正己烷：丙酮体积比分别为4：1、3：1及2：1的二元梯度洗脱体系。

4.如权利要求1-3其中之一所述的从红豆杉细胞培养生产的紫杉醇粗品中纯化紫杉醇的方法，其特征在于，根据调整Rf值，流动相二氯甲烷和乙酸乙酯或正己烷和丙酮的混合溶剂回收循环使用。