[发明专利]一种从猪毛中提取和检测皮质醇的方法有效
申请号: | 201410064922.9 | 申请日: | 2014-02-26 |
公开(公告)号: | CN103776997A | 公开(公告)日: | 2014-05-07 |
发明(设计)人: | 杨晓静;黄燕平;马文强;赵茹茜 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
主分类号: | G01N33/53 | 分类号: | G01N33/53 |
代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人: | 徐冬涛 |
地址: | 211225 江苏省南京市溧*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 猪毛中 提取 检测 皮质醇 方法 | ||
1.一种从猪毛中提取和检测皮质醇的方法,该方法包括以下步骤:
1)取猪毛,用有机溶剂洗涤后晾干;
2)将晾干后的猪毛和有机溶剂混合,得到混合物;
3)将所述的混合物360°旋转后,离心并收集上层清夜;
4)将所述的上层清液用氮气流浓缩吹干,吹干后用PBS溶液溶解,溶解后采用放射免疫测定法测定皮质醇含量。
2.根据权利要求1所述的从猪毛中提取和检测皮质醇的方法,其特征在于:步骤1)中所述猪毛的长度为0.8~1.2mm。
3.根据权利要求1所述的从猪毛中提取和检测皮质醇的方法,其特征在于:步骤1)中所述有机溶剂为无水甲醇,步骤2)中所述的有机溶剂为无水甲醇。
4.根据权利要求1所述的从猪毛中提取和检测皮质醇的方法,其特征在于:所述步骤1)中洗涤的次数为3次。
5.根据权利要求1所述的从猪毛中提取和检测皮质醇的方法,其特征在于:步骤2)中猪毛与有机溶剂的质量比为1:3.5~4.5。
6.根据权利要求1所述的从猪毛中提取和检测皮质醇的方法,其特征在于:步骤3)中所述的360°旋转是在转动器中进行,旋转的速度为28~32rpm,旋转的时间为22~24h。
7.根据权利要求1所述的从猪毛中提取和检测皮质醇的方法,其特征在于:步骤3)中所述的离心是以转速为4500rpm的速度转动12~18分钟。
8.根据权利要求1或7所述的从猪毛中提取和检测皮质醇的方法,其特征在于:所述步骤3)中的离心是在温度为20℃的条件下进行。
9.根据权利要求1所述的从猪毛中提取和检测皮质醇的方法,其特征在于:所述步骤4)中PBS溶液的PH=7.4,浓度为0.1mol/L。
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