[发明专利]邻苯二甲酸二丁酯化学发光酶联免疫检测试剂盒及其使用方法在审
申请号: | 201410066333.4 | 申请日: | 2014-02-26 |
公开(公告)号: | CN103822913A | 公开(公告)日: | 2014-05-28 |
发明(设计)人: | 杨金易;沈玉栋;孙远明;柳春红;羿利华;雷红涛;徐振林;王弘;肖治理 | 申请(专利权)人: | 华南农业大学 |
主分类号: | G01N21/76 | 分类号: | G01N21/76;G01N33/535;G01N33/68 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 任重 |
地址: | 510642 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 邻苯二 甲酸 酯化 发光 免疫 检测 试剂盒 及其 使用方法 | ||
1.一种邻苯二甲酸二丁酯化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于,包含以下成分:
(1)包被有邻苯二甲酸二丁酯抗原的化学发光酶标板;
(2)邻苯二甲酸二丁酯酶标抗体;
(3)邻苯二甲酸二丁酯标准品溶液;
(4)化学发光液;
(5)浓缩洗涤液;
所述的邻苯二甲酸二丁酯抗原为4-氨基邻苯二甲酸二丁酯与卵清蛋白的偶联物。
2. 根据权利要求1所述邻苯二甲酸二丁酯化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于,所述的邻苯二甲酸二丁酯酶标抗体为辣根过氧化酶标记的邻苯二甲酸二丁酯单克隆抗体或辣根过氧化酶标记的兔多克隆抗体。
3.根据权利要求1所述邻苯二甲酸二丁酯化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于,所述的邻苯二甲酸二丁酯标准品溶液的浓度为1mg/mL,使用时用磷酸盐吐温缓冲液将标准品溶液稀释成不同浓度的邻苯二甲酸二丁酯标准品溶液。
4.根据权利要求1所述邻苯二甲酸二丁酯化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于,所述化学发光液由A液和B液组成;
A液的配方为:将对碘苯酚、鲁米诺、Tris溶于去离子水,用盐酸调pH至8.2~8.6得到;
B液的配方为:将体积分数0.40% 的H2O2、Tris溶于去离子水,用盐酸调pH至6.8~7.2得到;
使用时将A液和B液按体积比1: 1的比例混合。
5.根据权利要求1所述邻苯二甲酸二丁酯化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于,所述浓缩洗涤液为含有体积浓度0.5% Tween-20的pH7.4 0.4mol/L的磷酸盐缓冲液;所述浓缩洗涤液为20倍浓缩洗涤液,使用时用去离子水稀释成1倍洗涤液。
6.根据权利要求3所述邻苯二甲酸二丁酯化学发光酶联免疫检测试剂盒,其特征在于,所述磷酸盐吐温缓冲液的浓度为0.01mol/L,pH5.4。
7.权利要求1~6任一所述的邻苯二甲酸二丁酯化学发光酶联免疫检测试剂盒的使用方法,其特征在于,包含如下步骤:
S1.将试剂盒从冷藏环境中取出,置于15~35℃平衡30 min~45min;
S2.取出化学发光酶标板,往标准孔中加入不同浓度的邻苯二甲酸二丁酯标准品溶液,样品孔中加入待测样品,然后每孔加入邻苯二甲酸二丁酯酶标抗体,盖上盖板膜振摇混匀,孵育;
S3.吸除板孔中的反应液,用洗涤液进行洗涤,将酶标板拍干;
S4.每孔加入化学发光液,轻拍混匀,盖上盖板膜,1~2min后测定各孔的发光值RLU;
S5.检测结果的计算与分析:确定样品中邻苯二甲酸二丁酯的含量。
8.根据权利要求7所述的邻苯二甲酸二丁酯化学发光酶联免疫检测试剂盒的使用方法,其特征在于S2所述的待测样品为酱油、果汁或白酒。
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