[发明专利]一种离体人造血干细胞扩增培养液配方

说明书

本发明涉及一种离体人造血干细胞扩增培养液配方。揭示了一种离体扩增造血干细胞的培养基和培养方法，通过所述培养基和培养方法可使造血干细胞在保持原来干性特征的基础上进行有效和大量的扩增，大大提高造血干细胞的体外扩增效率。

技术领域

本发明属于生物医学领域；更具体地，本发明涉及一种离体人造血干细胞扩增培养液配方。

背景技术

干细胞(Stem Cells)是一类具有自我更新及多向分化潜能的细胞群体，即这些细胞可以通过细胞分裂维持自身细胞群的大小，同时又可以进一步分化成为各种不同的组织细胞，从而医学界称之为“万能细胞”。这种独一无二的特性使其成为再生医学和移植医学的一个不可缺少的细胞来源。也使它成为众多疾病，如血液疾病、帕金森病，糖尿病，脊髓损伤、癌症和心脏病等细胞治疗的最佳候选者，因此对于干细胞的研究在临床应用领域意义重大。

造血干细胞(Hematopoietic Stem Cell，HSC)是存在于造血组织中的一群原始造血细胞，它不是组织固定细胞，可存在于造血组织及血液中。造血干细胞在人胚胎2周时可出现于卵黄囊，妊娠5个月后，骨髓开始造血，出生后骨髓成为造血干细胞的主要来源。在造血组织中，干细胞所占比例甚少。现代医学中，造血干细胞在骨髓移植和疾病治疗方面有重要作用。

造血干细胞在应用过程中一个瓶颈是不能够有效的体外扩增并且在体外扩增中会失去其干性。可用数量的细胞非常少，根本不能满足临床医治的需求。已知的造血干细胞的扩增方法有使用饲养层细胞的方法，此方法不能使子干细胞维持与母干细胞相同的成熟状态，最佳可以扩增干细胞5倍左右，且引入了外源性的细胞干扰，不利于扩增后用于临床移植，易提高移植物抗宿主反应(GVHD)发生风险。

因此，本领域迫切需要提供针对造血干细胞的有效培养和扩增的试剂和方法。

发明内容

本发明的目的在于提供高效离体人造血干细胞扩增培养液配方。

在本发明的第一方面，提供一种用于造血干细胞扩增培养的细胞因子组合物，所述的组合物是细胞因子组合物2，包括：

在一个优选例中，所述的细胞因子组合物2包括：

在另一优选例中，所述的细胞因子组合物2包括：

在本发明的另一方面，提供所述的细胞因子组合物2的用途，用于制备造血干细胞扩增培养的培养基。

在本发明的另一方面，提供一种用于造血干细胞扩增培养的培养基，所述的培养基是培养基2，包括：IMDM培养基；和前面任一所述的细胞因子组合物2。

在一个优选例中，该培养基还包括胎牛血清。

在另一优选例中，所述的胎牛血清是按照体积8-12%，较佳地10%的用量。

在本发明的另一方面，提供所述的培养基2的用途，用于扩增培养(为离体培养)造血干细胞。

在一个优选例中，所述的造血干细胞是人脐带血造血干细胞。

在本发明的另一方面，提供一种用于造血干细胞扩增培养的试剂盒，所述的试剂盒中包括：前面任一所述的细胞因子组合物2。

在一个优选例中，所述试剂盒中还包括：细胞因子组合物1，该细胞因子组合物1包括：

在另一优选例中，所述的细胞因子组合物1包括：