[发明专利]一种从东方伊萨酵母生物转化液中分离纯化胞二磷胆碱的方法

权利要求书

1.一种从东方伊萨酵母生物转化液中分离纯化胞二磷胆碱的方法，其特征在于包括如下步骤：

（1）将CDP-c含量为0.1～10g/L的东方伊萨酵母生物转化液通过强碱或弱碱性阴离子交换树脂柱；

（2）上柱完毕，用去离子水淋洗所述阴离子交换树脂柱，冲洗掉未吸附物质；

（3）用0.01～0.50M的盐溶液洗柱，直至柱出口处流出液不再含有CDP-c，收集洗脱液，得到高纯度CDP-c溶液；

（4）用0.10～1.00M的盐溶液洗柱，直至柱出口处流出液不再含有胞苷酸，收集洗脱液，蒸发浓缩，透析袋去盐，冻干，回收得到胞苷酸。

2.如权利要求1所述分离纯化胞二磷胆碱的方法，其特征在于：步骤（1）所述强碱或弱碱性阴离子交换树脂柱选自大孔苯乙烯系强碱性阴离子交换树脂柱或大孔苯乙烯系弱碱性阴离子交换树脂柱，上柱总量为柱总交换量的5～40%（质量比），柱高径比为10：1～50:1。

3.如权利要求2所述分离纯化胞二磷胆碱的方法，其特征在于：所述大孔苯乙烯系强碱性阴离子交换树脂柱或大孔苯乙烯系弱碱性阴离子交换树脂柱包括717、D301、D318，颗粒度0.3～1.2mm≥95%。

4.如权利要求2所述分离纯化胞二磷胆碱的方法，其特征在于：所述大孔苯乙烯系强碱性阴离子交换树脂柱或大孔苯乙烯系弱碱性阴离子交换树脂柱上柱总量为柱总交换量的10～15%（质量比）,柱高径比为10：1～20:1。

5.如权利要求1所述分离纯化胞二磷胆碱的方法，其特征在于：步骤（1）所述强碱或弱碱性阴离子交换树脂柱上柱流速为0.2～2mL/min。

6.如权利要求1所述分离纯化胞二磷胆碱的方法，其特征在于：步骤（3）所述盐溶液浓度为0.02～0.20M。

7.如权利要求1所述分离纯化胞二磷胆碱的方法，其特征在于：步骤（4）所述盐溶液浓度为0.20～0.50M。

8.如权利要求1所述分离纯化胞二磷胆碱的方法，其特征在于：步骤（3）和（4）所述洗脱用盐溶液选自NaCl、NH₄HCO₃、NaHCO₃、NH₄Cl、Na₂CO₃、KCl、KHCO₃、K₂CO₃。

9.如权利要求1所述分离纯化胞二磷胆碱的方法，其特征在于还包括将步骤（3）所得CDP-c溶液浓缩后，通过截留分子量100的透析袋去盐，冻干，得到纯度98%以上胞二磷胆碱固体的步骤。

10.如权利要求1所述分离纯化胞二磷胆碱的方法，其特征在于还包括在CDP-c分离纯化结束后，将所述阴离子交换树脂柱用盐、酸和碱分别冲洗以循环使用的步骤。