[发明专利]一种高产丁醇的基因工程菌株及其应用有效
申请号: | 201410069441.7 | 申请日: | 2014-02-27 |
公开(公告)号: | CN103820367A | 公开(公告)日: | 2014-05-28 |
发明(设计)人: | 应汉杰;王冬;郭亭;刘俊;华莹;谢婧婧;陈勇 | 申请(专利权)人: | 南京工业大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N15/74;C12P7/16;C12R1/145 |
代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 肖明芳 |
地址: | 210009 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 高产 丁醇 基因工程 菌株 及其 应用 | ||
1.一种高产丁醇的基因工程菌株,其特征在于,它是在拜氏梭菌中插入失活编码NADH-辅酶Q氧化还原酶关键亚基的基因Cbei_4110,从而得到重组菌株。
2.根据权利要求1所述的高产丁醇的基因工程菌株,其特征在于,所述的拜氏梭菌为拜氏梭菌(Clostridium beijerinckii)NCIMB8052。
3.根据权利要求1所述的高产丁醇的基因工程菌株,其特征在于,所述的基因Cbei_4110,其核苷酸序列如SEQ ID No:1所示。
4.权利要求1所述的高产丁醇的基因工程菌株的构建方法,其特征在于,它包括如下步骤:
(1)构建Cbei_4110基因的插入失活重组载体;
(2)将步骤(1)得到的重组载体转化入拜氏梭菌中,获得Cbei_4110基因插入失活的重组菌株。
5.根据权利要求4所述的高产丁醇的基因工程菌株的构建方法,其特征在于,步骤(1)中,以含有二型内含子的大肠杆菌-拜氏梭菌穿梭载体pWJ为出发载体,构建Cbei_4110基因的插入失活载体pWJ-392。
6.根据权利要求4所述的高产丁醇的基因工程菌株的构建方法,其特征在于,步骤(2)中,将pWJ-392引入拜氏梭菌中,实现Cbei_4110基因的插入失活,采用电转化法。
7.权利要求1所述的高产丁醇的基因工程菌株在发酵制备丁醇中的应用。
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