[发明专利]牛体外受精胚胎培养液和培养方法

权利要求书

1.一种牛体外受精胚胎培养液，其特征在于，所述培养液配方为：NaCl 109.0-110mM、KCl 2.9-3.1mM、NaHCO₃26.0-26.5mM、MgCl₂·6H₂O0.5-1.0mM、KH₂PO₃1.0-1.3mM、丙酮酸钠0.4mM、葡萄糖1.5mM、半乳糖酸钙5mM、10v/v%胎牛血清、L-谷氨酰胺1mM、2v/v%必需氨基酸、1v/v%非必须氨基酸和谷胱甘肽1-10mM，以水配制；

所述必需氨基酸为以下氨基酸按比例混合后配制的水溶液，其中，各氨基酸含量为：L-盐酸精氨酸6.32g/L、L-胱氨酸二盐酸盐1.564g/L、L-盐酸组氨酸一水物2.1g/L、L-异亮氨酸2.625g/L、L-亮氨酸2.62g/L、L-赖氨酸盐酸盐3.625g/L、L-蛋氨酸0.755g/L、L-苯丙氨酸1.65g/L、L-苏氨酸2.38g/L、L-色氨酸0.51g/L、L-酪氨酸1.8g/L和L-缬氨酸2.34g/L；

所述非必须氨基酸为以下氨基酸按比例混合后配制的水溶液，其中，各氨基酸含量为：L-丙氨酸0.89g/L、:L-天门冬酰胺一水物1.5g/L、L-天冬氨酸1.33g/L、L-谷氨酸1.47g/L、甘氨酸0.75g/L、L-脯氨酸1.15g/L和L-丝氨酸1.05g/L。

2.根据权利要求1所述的培养液，其特征在于，所述培养液配方为：NaCl109.5M、KCl3.1M、NaHCO₃26.2M、MgCl₂·6H₂O0.8mM、KH₂PO₃1.19M、丙酮酸钠0.4mM、葡萄糖1.5mM、半乳糖酸钙5mM、10v/v%胎牛血清、L-谷氨酰胺1mM、2v/v%必需氨基酸、1v/v%非必须氨基酸和谷胱甘肽1-10mM。

3.根据权利要求1或2所述的培养液，其特征在于，所述培养液中谷胱甘肽含量为1mM、3mM、5mM或7mM。

4.根据权利要求3所述的培养液，其特征在于，所述培养液中谷胱甘肽含量为3mM或5mM。

5.根据权利要求4所述的培养液，其特征在于，所述培养液中谷胱甘肽含量为3mM。

6.牛体外受精胚胎的培养方法，其特征在于，将牛体外受精胚胎置于权利要求1-5任一项所述培养液中，在38.5℃、0.5%CO₂、100%湿度条件下进行体外培养。