[发明专利]一种用于美容保养的精华液及其制备方法

权利要求书

1.一种用于美容保养的精华液，其特征在于：该精华液由以下按重量百分比组份组成：添加多种生长因子和维生素的表皮干细胞培养浓缩液78.8%、甘油20%和玻尿酸0.2%。

2.根据权利要求1所述的一种用于美容保养的精华液，其特征在于：所述的表皮干细胞培养浓缩液是表皮干细胞培养液按照5:1的比例浓缩制成。

3.根据权利要求1所述的一种用于美容保养的精华液，其特征在于：所述的表皮干细胞培养浓缩液中依次添加了多种生长因子和维生素。

4.根据权利要求1所述的一种用于美容保养的精华液，其特征在于：所述的多种生长因子和维生素的种类及含量分别为：成纤维细胞生长因子0.25 mg/L，表皮细胞生长因子25.5 mg/L，Ⅰ型胶原蛋白0.5 mg/L，角质细胞生长因子3 mg/L，辅酶Q 50g/L，医用维生素C 50g/L，医用维生素B₅ 50g/L，医用维生素E 50g/L。

5.权利要求1所述的一种用于美容保养的精华液的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤1）采集获取新生儿脐带表皮细胞：用含有青链霉素的生理盐水冲洗新生儿脐带组织，剪成小块后铺在细胞培养皿中培养；

步骤2）培养皿包被：表皮细胞培养皿用多聚赖氨酸包被，自然晾干后使用；

步骤3）表皮细胞培养传代：用原代培养基对将贴壁的表皮细胞进行原代培养，每三天更换一次表皮细胞培养液；消化细胞，消化结束用传代培养基进行终止消化，按1:3比例进行传代培养；

步骤4）收集细胞培养液：收集传代前的细胞培养上清液，得到细胞培养液；

步骤5）原液过滤：收集的细胞培养液经过过滤系统，滤去细胞碎片及微生物；

步骤6）过滤液浓缩：过滤液置于5K的超滤管中低温高速离心，得到的浓缩液置于4℃冰箱储存；

步骤7）加入细胞因子：向细胞培养液中加入精确含量的细胞因子；

步骤8）加入甘油及玻尿酸：向以上精华液中加入医用甘油和玻尿酸原液，混合均匀。

6.根据权利要求5所述的一种用于美容保养的精华液的制备方法，其特征在于：所述步骤1）中用含有青链霉素的生理盐水冲洗新生儿脐带组织的次数至少为3次，脐带组织剪成0.2-0.5mm的小块。

7.根据权利要求5所述的一种用于美容保养的精华液的制备方法，其特征在于：所述步骤2）中多聚赖氨酸的浓度为100ug/ml。

8.根据权利要求5所述的一种用于美容保养的精华液的制备方法，其特征在于：所述步骤3）中原代培养基为NaHCO₃含量0.37%的高糖DMEM培养基，胎牛血清含量20%；传代培养基为NaHCO₃含量0.37%的高糖DMEM培养基，胎牛血清含量5%，消化细胞所用的消化液是不含EDTA的0.025%的胰酶，消化细胞的条件为37℃，CO₂浓度5%，3分钟。

9.根据权利要求5所述的一种用于美容保养的精华液的制备方法，其特征在于：所述步骤4）中收集细胞培养液为细胞第3-6代的细胞培养液。

10.根据权利要求5所述的一种用于美容保养的精华液的制备方法，其特征在于：所述步骤5）中收集的细胞培养液的过滤系统为孔径0.22um的PES过滤系统。

11.根据权利要求5所述的一种用于美容保养的精华液的制备方法，其特征在于：所述步骤6）中低温高速离心的条件为温度4℃，离心力12000g，离心2小时。