[发明专利]一种用于美容保养的精华液及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种生物化妆品及其制备方法，具体涉及一种用于美容保养的人表皮细胞培养物精华液及其制备方法，属于生物技术和化妆品领域。

背景技术

近年来，美容市场涌现出大量护肤精华液。但现有精华液的有效成分多为植物成分提取物，而液体本身属于精细化工产品，而且为了提高化妆品的美容作用，多数含有铅、汞、酒精、防腐剂、激素、香料等对肌肤有害的物质。消费者在使用精华液保养肌肤的同时，也对皮肤造成了很大伤害，甚至产生色斑、红血丝、过敏等问题，对消费者身体健康造成了极大的威胁。加之，现有的产品大都通过化工方法提炼制成，其产品中的有害有机物残留较多，长期使用会对皮肤产生不利影响。而且，多数现有产品缺乏动物性活性物质，不能够促进表皮细胞的新陈代谢，改善皮肤质量。

目前已经公开的一种用于美容保养的成纤维细胞液，其主要成分为成纤维细胞液含有细胞培养液、胶原蛋白、细胞生长因子、氨基酸和维生素，其中细胞生长因子包括成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子、肝细胞生长因子和角质细胞生长因子；制备成纤维细胞液的方法包括获取脐带组织真皮细胞、原代培养脐带真皮组织细胞、传代培养脐带组织真皮细胞、收集细胞培养液、加入甘油和细胞因子制得成纤维细胞液等步骤。该成纤维细胞液虽然具有促进表皮细胞新陈代谢的作用，但美容保养作用有限。而且该制备方法简便易，培养液处理步骤少，微生物污染的几率较大，因此需要对其制作工艺进行改良。

细胞培养物精华液，是最近几年新发展起来的生物技术领域衍生产品，利用培养液中的生物成分，与经典护肤产品甘油、玻尿酸配伍，制成具有生物活性的美容精华液，具有显著的护肤效果。而且该产品的生产方法脱离了化工生产工艺，无有害物质残留，具有很高的安全性，具有较好的推广和应用前景。

发明内容

为了克服现有精华液的制作工艺的缺陷，本发明的目的在于提供一种纯天然、无有机物残留的表皮细胞培养物精华液及其制备方法。

为实现上述技术目的，达到上述技术效果，本发明通过以下技术方案实现：

一种用于美容保养的精华液，该精华液由以下按重量百分比的组份组成：添加多种生长因子和维生素的表皮干细胞培养浓缩液78.8%、甘油20%和玻尿酸0.2%。

进一步的，所述的表皮干细胞培养浓缩液是表皮干细胞培养液按照5:1的比例浓缩制成。

进一步的，所述的表皮干细胞培养浓缩液中依次添加了多种生长因子和维生素。

进一步的，所述的多种生长因子和维生素的种类及含量分别为：成纤维细胞生长因子0.25 mg/L，表皮细胞生长因子25.5 mg/L，Ⅰ型胶原蛋白0.5 mg/L，角质细胞生长因子3 mg/L，辅酶Q 50g/L，医用维生素C 50g/L，医用维生素B₅ 50g/L，医用维生素E 50g/L。

一种用于美容保养的精华液的制备方法，包括以下步骤：

步骤1）采集获取新生儿脐带表皮细胞：用含有青链霉素的生理盐水冲洗新生儿脐带组织，剪成小块后铺在细胞培养皿中培养；

步骤2）培养皿包被：表皮细胞培养皿用多聚赖氨酸包被，自然晾干后使用；

步骤3）表皮细胞培养传代：用原代培养基对将贴壁的表皮细胞进行原代培养，每三天更换一次表皮细胞培养液；消化细胞，消化结束用传代培养基进行终止消化，按1:3比例进行传代培养；

步骤4）收集细胞培养液：收集传代前的细胞上清液，得到细胞培养液；

步骤5）原液过滤：收集的细胞培养液经过过滤系统，滤去细胞碎片及微生物；

步骤6）过滤液浓缩：过滤液置于5K的超滤管中低温高速离心，得到的浓缩液置于4℃冰箱储存；

步骤7）加入细胞因子：向细胞培养液中加入精确含量的细胞因子；

步骤8）加入甘油及玻尿酸：向以上加入细胞因子的浓缩液中加入医用甘油和玻尿酸原液，混合均匀。

进一步的，所述步骤1）中用含有青链霉素的生理盐水冲洗新生儿脐带组织的次数至少为3次，脐带组织剪成0.2-0.5mm的小块。

进一步的，所述步骤2）中多聚赖氨酸的浓度为100ug/ml。

进一步的，所述步骤3）中原代培养基为NaHCO₃含量0.37%的高糖DMEM培养基，胎牛血清含量20%；传代培养基为NaHCO₃含量0.37%的高糖DMEM培养基，胎牛血清含量5%，消化细胞所用的消化液是不含EDTA的0.025%的胰酶，消化细胞的条件为37℃，CO₂浓度5%，3分钟。