[发明专利]人类松弛素-2衍生物以及由其制备人类松弛素-2的方法

权利要求书

1.一种制备人类松弛素-2的方法，包括如下步骤：

1)制备A链衍生物A-1；

所述的A-1，其具有如下所示的结构：

pGlu-Leu-Tyr-Ser-Ala-Leu-Ala-Asn-Lys-Cys-Cys(Acm)-His-Val-Gly-Cys-Thr-Lys-Arg-Ser-Leu-Ala-Arg-Phe-Cys-OH；

2)A链衍生物A-1经自然氧化获得A链衍生物A-2；

所示的A-2，其具有如下所示的结构：

3)制备B链衍生物B-1；

所述的B-1，其具有如下所示的结构：

H-Asp-Ser-Trp-Met-Glu-Glu-Val-Ile-Lys-Leu-Cys(Acm)-Gly-Arg-Glu-Leu-Val-Arg-Ala-Gln-Ile-Ala-Ile-Cys-Gly-Met-Ser-Thr-Trp-Ser-OH

4)A-2与2,2'-二吡啶二硫PySSPy反应，获得A链衍生物A-3；

或者是B-1与2,2'-二吡啶二硫PySSPy反应，获得B链衍生物B-2；

所述的A-3，其具有如下所示的结构：

所述的B-2，其具有如下所示的结构：

5)B-2与A-2反应；或者是B-1与A-3反应获得具有如下所示的A-B：

6)步骤5)获得的A-B经氧化获得人类松弛素-2粗品；

7)步骤6)获得的人类松弛素-2粗品经纯化、转盐和冻干后获得人类松弛素-2纯品；

其中，所述的A链衍生物A-1的制备方法，包括如下步骤：

(1)Fmoc-Cys(Trt)-OH和树脂反应，获得Fmoc-Cys(Trt)-树脂；

(2)Fmoc-Cys(Trt)-树脂采用逐一偶联的方式偶联Fmoc保护基团的其他氨基酸，获得A链肽树脂；

(3)A链肽树脂经裂解反应，获得A链衍生物A-1；

其中，所述的B链衍生物B-1的制备方法，包括如下步骤：

S1.Fmoc-Ser(tbu)-OH和树脂反应，获得Fmoc-Ser(tbu)-树脂；

S2.Fmoc-Ser(tbu)-树脂采用逐一偶联的方式偶联Fmoc保护基团的其他氨基酸，获得B链肽树脂；

S3.B链肽树脂经裂解反应，获得B链衍生物B-1；

其中，步骤6)所述的氧化采用碘作为氧化剂。

2.根据权利要求所述1的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的树脂为2-CTC树脂。

3.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(2)所述的Fmoc保护基团的其他氨基酸分别为Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Arg(pbf)-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Ser(tbu)-OH、Fmoc-Arg(pbf)-OH、Fmoc-Lys(boc)-OH、Fmoc-Thr(tbu)-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-His(trt)-OH、Fmoc-Cys(Acm)-OH、Fmoc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-Lys(boc)-OH、Fmoc-Asn(trt)-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Ser(tbu)-OH、Fmoc-Tyr(tbu)-OH、Fmoc-Leu-OH和pGlu-OH。

4.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(3)中采用的裂解液为TFA:PHOH:PHSME:EDT:H₂O＝80v:5v:5v:2.5v:5v。

5.根据权利要求1所述的方法 ，其特征在于，步骤S1中，所述的树脂为wang树脂。