[发明专利]人类松弛素-2衍生物以及由其制备人类松弛素-2的方法

说明书

本发明属于药物合成技术领域，公开了人类松弛素‑2的A链衍生物和B链衍生物以及由上述衍生物制备人类松弛素‑2的方法，其中A链衍生物中的一对二硫键采用自然氧化法，并且采用PySSPy活化巯基，便于形成第二对二硫键，最后采用碘氧化形成第三对二硫键，成功避免了一步自然氧化法易产生错位的二硫键。此外，本发明采用简单、常用的巯基保护基，避免了采用Stbu等需要特殊切割试剂的巯基保护基，更有利于工业化生产。

技术领域

本发明涉及药物合成技术领域，具体涉及人类松弛素-2衍生物以及由其制备人类松弛素-2的方法。

背景技术

人类松弛素-2，通常简称为RLN2，药物名称也被命名为Relaxin，即松弛肽，是人体内发现的一种多肽激素。人类松弛素-2由两条链组成，A链含24个氨基酸且存在链内二硫键，B链含29个氨基酸，A链与B链通过两个二硫键相连，其结构式如下：

近年来的一系列研究发现，人类松弛素-2对心力衰竭等心血管疾病具有显著的治疗作用，能够扩张体循环血管、扩张肾脏血管并增加动脉顺应性。美国专利US5166191A已经公开了人类松弛素用于治疗心血管疾病，尤其是急性和慢性心力衰竭的方法专利。

人类松弛素-2的制备方法国内外均有报道，其中Erika E.Bullesbach和Christian Schwabe公开了一种人类松弛素-2的固相合成方法（参见Erika E.Bullesbachand Christian Schwabe:“Totalsynthesis of human relaxin and human relaxinderivatives by solid-phasepeptide synthesis and site-directed chaincombination”,the Journal of Biological Chemistry,1991,第266卷，第17期，第10754-10761页）。在该方法中，松弛素-2的A链采用Fmoc法合成，B链采用Boc法合成，合成过程需要采用HF处理两次，并且需要三步进行链的组合，不同的二硫键采用不同的保护基、不同的脱保护剂，因此操作极其复杂，并且产率很低，以使用的人类松弛素-2的B链计算，总产率仅为1.4％。可以认为，从经济学上讲，其在大规模生产中不可接受。

2010年，Kostas K.Barlos等公开了一种人类松弛素-2的化学合成方法（参见Kostas K.Barlos等:“An optimized chemical synthesis of human relaxin-2”,Journal of Peptide Science,2010,第16卷，第4期，第200-211页）。在该方法中，松弛素-2的A链和B链均采用Fmoc法合成，二硫键的形成采用随机组合法，各个半胱氨酸的侧链采用同一保护基。这一方法可提高松弛素-2的产率，但产率也仅为48％，且松弛素-2的B链的合成工艺复杂，不利于工业化生产。

CN102180964A公开了一种人类松弛素-2的固相合成方法，松弛素-2的A链和B链均采用Fmoc法合成，但氨基酸侧链采用特殊基团保护，不同半胱氨酸侧链采用交叉保护基。然而，此类保护基团不易脱除，工业化有一定难度。

目前，单链小分子多肽的合成技术已经成熟。虽然松弛素-2的A链和B链的固相合成已经可以得到较好的收率，但是将A链和B链链接制备松弛素-2的固相合成方法的收率仍然较低。

发明内容

本发明针对现有技术中存在的上述缺陷，通过各个半胱氨酸的侧链采用常用的不同侧链保护基，通过不同氧化方法得到人类松弛素-2的A链衍生物和B链衍生物，从而制备人类松弛素-2。该方法操作简单、设备要求低，易于工业化生产。

为此，本发明一方面提供了人类松弛素-2的A链衍生物A-1，其具有如下所示的结构，