[发明专利]高效液相色谱检测多肽尿素中聚天冬氨酸的方法有效
申请号: | 201410077221.9 | 申请日: | 2014-03-04 |
公开(公告)号: | CN103776948A | 公开(公告)日: | 2014-05-07 |
发明(设计)人: | 杨博;冉文生;李小飞;姚海军;葛春辉 | 申请(专利权)人: | 新疆维吾尔自治区产品质量监督检验研究院 |
主分类号: | G01N30/89 | 分类号: | G01N30/89 |
代理公司: | 乌鲁木齐中科新兴专利事务所 65106 | 代理人: | 李静 |
地址: | 830011 新疆维吾*** | 国省代码: | 新疆;65 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 高效 色谱 检测 多肽 尿素 天冬氨酸 方法 | ||
1.一种高效液相色谱检测多肽尿素中聚天冬氨酸的方法,其特征在于按下列步骤进行:
a、色谱柱的选择:选用规格为5um,250×4.6mm,C18柱;
b、流动相的选择:选用流动相为体积比甲醇∶水=6:94,加入体积百分比三乙胺0.04%,用体积比稀磷酸1∶10调节流动相pH 9.5;
c、检测波长的选择:用LabTech754系列紫外线可见分光光度计在209nm 处进行紫外吸收扫描;
d、标准溶液配置及外标法标准工作曲线的确定:称取0.4075g聚天冬氨酸标准品用步骤b流动相定溶于50ml容量瓶中,作为母液,随后配制系列浓度为0.0033mg/ml、0.0065 mg/ml、0.0163 mg/ml、0.0408 mg/ml、0.0815 mg/ml和0.1630 mg/ml的聚天冬氨酸标准品溶液,每个点做三个平行试验,做外标曲线;
e、样品的测定方法:称取4.0055g多肽尿素样品,用步骤b流动相定容于50ml容量瓶中,然后吸取2.5ml溶液定容于25ml容量瓶中,采用步骤a选择的 C18色谱柱,用步骤b选择的流动相,以流动相流速0.7ml/min在液相色谱上测试6次即可。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于步骤b中的水为双蒸水。
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