[发明专利]一种检测人免疫球蛋白G4的试剂盒及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属生物工程领域，涉及一种试剂盒，具体来说是一种检测人免疫球蛋白G4的试剂盒及其制备方法。

背景技术

人免疫球蛋白G4（IgG4）是人免疫球蛋白的一个重要亚类。国外测定人免疫球蛋白G4的试剂盒是采用ELISA技术及免疫增强散射技术。采用ELISA技术的测定试剂盒，其检测过程耗时漫长，且需样本批量检测，患者不能及时得到检测报告。采用免疫增强散射技术的测定试剂盒虽在一定程度上弥补了上述方法的缺点，但是需昂贵的专门仪器，检测一个样本需20分钟，且不能使用全血样品。发明内容

针对上述现有技术中存在的缺陷，本发明所要解决的技术问题是提供一种检测人免疫球蛋白G4的试剂盒及其制备方法，所述的这种试剂盒检测方便及时，而且成本低。

本发明一种检测人免疫球蛋白G4的试剂盒，包括一个固相载体，所述的固相载体上结合有特异性抗人免疫球蛋白G4抗体或含有抗人免疫球蛋白G4抗体活性物质的蛋白，还包括一个胶体金标记物，所述的胶体金标记物是胶体金标记的特异性抗人免疫球蛋白G4抗体或胶体金标记的含有抗人免疫球蛋白G4抗体活性物质的蛋白。

进一步的，所述的特异性抗人免疫球蛋白G4抗体或含有抗人免疫球蛋白G4抗体活性物质的蛋白通过物理吸附、或生物活性、或化学基团偶联的方法固相于载体。

具体的，抗人免疫球蛋白G4抗体活性物质的蛋白是指具有或包含有特异性抗人免疫球蛋白G4抗体特性的，即能与人免疫球蛋白G4抗原发生抗原--抗体结合反应的一类物质。

进一步的，所述的固相载体为纤维素酯类微孔膜、或者聚酰胺类微孔膜、或者聚砜类微孔膜、或者含氟类微孔膜、或者聚碳酸酯、或者聚酯类微孔膜、或者聚烯烃类微孔膜、或者无机材料微孔膜、或者玻璃纤维。

本发明还提供了上述的一种检测人免疫球蛋白G4的试剂盒的制备方法，包括一个制备固相载体的步骤，在所述的制备固相载体的过程中，将特异性抗人免疫球蛋白G4抗体或含有抗人免疫球蛋白G4抗体活性物质的蛋白通过物理吸附、或生物活性、或化学基团偶联的方法固相于载体，还包括一个将胶体金标记于抗人免疫球蛋白G4抗体或含抗人免疫球蛋白G4抗体活性物质的蛋白的步骤。

本发明还提供了一种检测人免疫球蛋白G4的装置，包括一个盒体，所述的盒体中设置一个薄板，所述的薄板上设置一个第一载体，所述的第一载体的一端设置有一个吸水垫，所述的第一载体的另外一端设置有一个第二载体，所述的第一载体上设置有特异性抗人免疫球蛋白G4抗体或含有抗人免疫球蛋白G4抗体活性物质的蛋白，所述的第二载体上设置有胶体金标记的抗人免疫球蛋白G4抗体或胶体金标记的含抗人免疫球蛋白G4抗体活性物质的蛋白，所述的盒体上设置有检测窗口。

进一步的，所述的载体为纤维素酯类微孔膜、或者聚酰胺类微孔膜、或者聚砜类微孔膜、或者含氟类微孔膜、或者聚碳酸酯、或者聚酯类微孔膜、或者聚烯烃类微孔膜、或者无机材料微孔膜、或者玻璃纤维。

具体的，所述的纤维素酯类微孔膜如醋酸纤维素（CA、CTA），硝化（酸）纤维素（CN），乙基纤维素（EC），混合纤维素（CN-CA）等。所述的聚酰胺类微孔膜如尼龙6（PA-6）和尼龙（PA-66）。所述的聚砜类微孔膜如聚砜（PS）和聚醚砜（PES）。所述的含氟类微孔膜如聚偏氟乙烯（PVDF）和聚四氟乙烯膜（PTFE）。所述的聚碳酸酯、聚酯类微孔膜和聚烯烃类微孔膜如聚丙烯（PP）。所述的无机材料微孔膜如陶瓷微孔膜、玻璃微孔膜，各类金属微孔膜等及玻璃纤维。

本发明还提供了采用上述的试剂盒检测人免疫球蛋白G4的方法，包括一个将被测人血清、血浆或者全血加入固相载体的过程，如被测人血清、血浆或者全血含有人免疫球蛋白G4，则形成固相特异性抗人免疫球蛋白G4抗体—免疫球蛋白G4抗原—特异性抗人免疫球蛋白G4抗体胶体金标记物，固相载体呈红色，反之呈无色。

本发明还提供了采用上述的试剂盒检测人免疫球蛋白G4的方法，包括一个将被测人血清、血浆或者全血加入固相载体的过程，然后将固相载体放置与金标读数仪中，在波长510-550nm读数，根据标准曲线来计算被测人血清、血浆或者全血中人免疫球蛋白G4的含量。

本发明还提供了采用上述的试剂盒检测人免疫球蛋白G4的方法，包括一个将被测人血清、血浆或者全血加入固相载体的过程，然后利用CCD图像扫描技术对胶体金产物进行图像扫描，然后对扫描后的图像加以分析，计算被测人血清、血浆或者全血中人免疫球蛋白G4的含量。