[发明专利]基于荧光检测方法的原位葡萄糖检测膜的制备方法无效
申请号: | 201410084483.8 | 申请日: | 2014-03-10 |
公开(公告)号: | CN103881128A | 公开(公告)日: | 2014-06-25 |
发明(设计)人: | 黄鹏;王谷丰 | 申请(专利权)人: | 黄鹏 |
主分类号: | C08J7/12 | 分类号: | C08J7/12;C08F220/28;C08F220/34;A61B5/145;G01N21/64 |
代理公司: | 南京君陶专利商标代理有限公司 32215 | 代理人: | 奚胜元 |
地址: | 215028 江苏省苏州市苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 荧光 检测 方法 原位 葡萄糖 制备 | ||
1.一种基于荧光检测方法的原位葡萄糖检测膜的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)准备制备材料葡萄糖指示剂分子
所述的葡萄糖指示剂分子能特异性的与葡萄糖结合,在与葡萄糖结合后,该分子的荧光强度降低;当体系中的该分子数量一定时,通过观测该类分子的总荧光强度,能够得知该分子所在环境的葡萄糖浓度;
2)准备制备材料载体
所述载体为葡萄糖指示剂分子载体,采用高分子聚合物膜;
所述载体通过使用高分子化合物的单体混合物,在加热或紫外光照射的情况下进行聚合得到共聚的高分子载体膜;
3)将步骤1)中准备的葡萄糖指示剂分子共价链接到步骤2)中准备的载体膜上;
具体共价链接步骤为,将载体膜在常压室温下,浸入含有0.1-1%甲醛,0.005-0.10M盐酸,和10mM-100 mM葡萄糖指示剂分子的溶液中,搅拌12-36小时;加PBS缓冲溶液充分洗涤,得到有共价连上葡萄糖指示剂分子的高分子膜;即基于荧光检测方法的原位葡萄糖检测膜。
2.根据权利要求1所述的基于荧光检测方法的原位葡萄糖检测膜的制备方法,其特征在于:制得的基于荧光检测方法的原位葡萄糖检测膜经过裁剪,能够植入体内,作为葡萄糖光学传感器的活性膜使用。
3.根据权利要求1所述的基于荧光检测方法的原位葡萄糖检测膜的制备方法,其特征在于:在所述葡萄糖指示剂分子共价链接到载体膜上之后,葡萄糖指示剂分子仍然保留认知葡萄糖的特异性和荧光光学活性。
4.根据权利要求1所述的基于荧光检测方法的原位葡萄糖检测膜的制备方法,其特征在于:步骤1)中所述的葡萄糖指示剂分子是基于硼酸的衍生物 ,该分子能够通过标准的Mannich反应与载体高分子膜共价链接。
5.根据权利要求1所述的基于荧光检测方法的原位葡萄糖检测膜的制备方法,其特征在于:所述基于硼酸的衍生物为2,3’-二羟基硼-4 - 羟基偶氮苯。
6.根据权利要求1所述的基于荧光检测方法的原位葡萄糖检测膜的制备方法,其特征在于:步骤2)中所述载体,采用聚丙烯酸羟乙酯hydroxyethylmethacrylate或其他类似的高分子载体,包括聚丙烯酸树脂及其共聚物。
7.根据权利要求1所述的基于荧光检测方法的原位葡萄糖检测膜的制备方法,其特征在于:步骤2)中载体膜的制备为,所述载体通过使用混合单体,在加热或紫外光照射的情况下进行聚合得到载体膜,例如,在常压室温下,使用1.0M、2.0M、2.5M或 3.0M 的HEMA水溶液,其中载体单体HEMA与有活性基团的单体AEMA的比例相应调控在1:3、1:10、1:20和1:33,在pH6-9磷酸缓冲溶液的条件下,将上述HEMA水溶液旋涂单晶硅晶圆表面,厚度为50-500 微米;365 nm UV光照6-36小时聚合,由此产生的水凝胶;用水充分洗涤以除去未反应的单体;将该水凝胶进行干燥,得到载体膜。
8.根据权利要求7所述的基于荧光检测方法的原位葡萄糖检测膜的制备方法,其特征在于:所述载体膜中的活性基团来自AEMA、其他活性类基团或其他携带有活性基团的单体,所述AEMA提供了一个悬挂的氨基,从而能够共价的来修饰这个高分子载体膜,携带有活性基团的单体为aminopropylmethacrylate即APMA,除此类伯氨类分子外,仲氨类分子也能使用;其他携带有活性基团为巯基即-SH、羧酸基即-COOH、羟基即-OH、醛基即-CHO和氰基即-CN。
9.根据权利要求7所述的基于荧光检测方法的原位葡萄糖检测膜的制备方法,其特征在于:所述的载体膜是疏水性的。
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