[发明专利]基于荧光检测方法的原位葡萄糖检测膜的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种基于荧光检测方法的原位葡萄糖检测膜的制备方法，特别是此种检测膜可用于新型微创、连续、实时血糖监测的可植入式原位（体内）血糖监测装置。

背景技术

糖尿病是现代疾病中的第二杀手，其对人体的危害仅次于癌症，作为一种较为普遍的内分泌疾病，它对人们的身心健康危害越来越大，而且有扩大化和年轻化的趋势。研究结果表明：糖尿病的主要特点是缓慢持续上升的血糖浓度，当血糖浓度上升到一定的高度时，高于肾糖阈则可以在尿液中检测到糖分。糖尿病患者由于血糖浓度异常而导致体内代谢紊乱，易引起糖尿病酮症、心脑血管病变、肾病、眼病、肢端坏疽和感染等严重并发症。此外，血糖浓度的升高可引发视网膜、肾脏及神经系统等的并发症。因此，治疗糖尿病的主要手段和目标就是维持血糖浓度的正常水平。

由于生命科学的复杂性，目前还没有彻底根治糖尿病的医学手段。现今治疗糖尿病，主要是采取控制血糖浓度以预防或减轻并发症的发生以及对症处理并发症，特别是通过频繁地监测血糖浓度并精确、及时地以此为据调整口服降糖药物和胰岛素的用量。已经有数据表明控制血糖浓度可以减少I型和II型糖尿病的并发症。

    另外，保持血糖含量接近正常水平在重症病房患者的护理上也是一个重要的课题。研究表明：使ICU患者血糖含量控制在接近正常水平，可显著提高他们的临床治疗效果。然而，血糖的严格控制是难以达到的并且要求相当频繁的测量。因此血糖的连续监测在糖尿病患者和重症患者的监护中也将会是一个大的进步。

     然而，现有条件下，医院中对血糖浓度的检测方法是利用生化试剂或酶与血液或血浆发生作用，通过试剂的消耗量或与酶作用后的颜色深浅变化来定性或定量地表示血糖浓度的高低。这种方法的缺点在于需要不断地消耗生化试剂，而且测量速度较慢，试剂及相关耗材处理不当还可能会造成污染，也不能得到连续的血糖测量结果，病患在白天、尤其是晚上时的血糖波动情况就可能被忽略，然而只有持续的血糖监测才能确保最佳的血糖调控。

     现在通过美国FDA和中国CFDA认证的，用于体内连续血糖监测的传感器是基于电化学原理，使用葡萄糖氧化酶进行分子识别的。这些传感器的不利条件包括：1.它们的电化学选择性有限。现有的所有的用于持续葡萄糖检测的设备都是通过测量葡萄糖氧化酶与过氧化氢的反应引发的电流变化来实现的。这一类的传感器会受到体内氧浓度变化的影响，同时还受到尿素、抗坏血酸（维生素C、尿酸），醋氨酚，等电活化粒种的影响。因此，基于电化学的葡萄糖测量用在重病患者身上是非常危险的。2.在传感器里有相当大的漂移电流,使读数失效。3.由于酶及蛋白质的使用，他们的传感器的寿命都极其有限。

现在已经有研究表明，皮下组织液内的葡萄糖浓度，与血液中葡萄糖浓度有正相关的关系。通过测量组织间液中的葡萄糖浓度，可以间接测量葡萄糖在血液中浓度的变化。因此，现在大多数传感器的发展方向，都是定位于持续检测组织间液中的葡萄糖浓度。在此种情况下，将传感器植入在皮下组织，是最合适的。它可以通过简单的外科手术实现。而且传感器在受损的情况下，相对容易替换。

基于荧光方法的测量方法，目前在美国及欧洲，是进行微创血糖检测研究的主流方向。目前在中国国内，尚没有企业公司研究成功。其具体原因，在于缺乏成功的传感器。因此，在现有条件下，研究微创条件下能够用于测量血糖浓度的基于荧光检测的传感器是十分有意义的。它不仅可以取代传统上的生化检测方法，达到节省耗材和快速测量的目的，而且也是微创检测血糖浓度的前提和基础。该技术的成功，也将会被广泛应用到糖尿病的基础研究中。

发明内容

本发明的目的是针对上述不足之处提供一种基于荧光检测方法的原位葡萄糖检测膜的制备方法，通过将检测膜植入体内，实现实时连续血糖监测。

基于荧光检测方法的原位葡萄糖检测膜的制备方法是采取以下技术方案实现的：

基于荧光检测方法的原位葡萄糖检测膜的制备方法包括如下步骤，

1）准备制备材料葡萄糖指示剂分子

所述的葡萄糖指示剂分子能特异性的与葡萄糖结合，在与葡萄糖结合后，该分子的荧光强度降低；当体系中的该分子数量一定时，通过观测该类分子的总荧光强度，能够得知该分子所在环境的葡萄糖浓度；所述葡萄糖指示剂分子为市售的葡萄糖指示剂分子；

 2）准备制备材料载体

所述载体为葡萄糖指示剂分子载体，采用高分子聚合物膜；