[发明专利]氨基酸叶面肥的制备方法

权利要求书

1.氨基酸叶面肥的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

A、将豆粕与酒精发酵废水按照重量比1:8～1:10的比例混合均匀，灭菌，得到发酵培养基；

B、将发酵培养基置于发酵罐中，将含有产朊假丝酵母或热带假丝酵母的第一种子培养液接种至发酵罐中，第一种子培养液与发酵培养基的体积比为2～5%，持续搅拌并通入无菌空气，在温度为30～35℃、搅拌转速为70～120r/min的条件下发酵24～48h；

C、然后将含有枯草芽孢杆菌的第二种子培养液以体积比1～3%的接种量接种至发酵罐，同时将含有黑曲霉菌的第三种子培养液以体积比1～3%的接种量接种至发酵罐，持续搅拌并通入无菌空气，在搅拌转速为120～180r/min的条件下发酵培养48～72h，然后停止搅拌和通气；

D、再将含有嗜酸乳杆菌的第四种子培养液以体积比3～5%的接种量接种至发酵罐，搅拌均匀后，停止搅拌和通气，继续发酵48～72小时，得到发酵液；

E、将发酵液进行过滤将发酵液中的固体分离，滤液即为氨基酸叶面肥。

2.根据权利要求1所述的氨基酸叶面肥的制备方法，其特征在于：所述第一种子培养液的有效活菌数（cfu）/〔×10⁸/g(ml)〕≥30，所述第二种子培养液的有效活菌数（cfu）/〔×10⁸/g(ml)〕≥50，所述第三种子培养液有效活菌数（cfu）/〔×10⁸/g(ml)〕≥30，所述第四种子培养液的有效活菌数（cfu）/〔×10⁸/g(ml)〕≥40。

3.根据权利要求2所述的氨基酸叶面肥的制备方法，其特征在于，所述第一种子培养液的制备方法如下：

1）制备第一培养基：将葡萄糖15～20g、酵母膏4～8g、蛋白胨8～10g、琼脂15～20g用蒸馏水定容至1000mL，用0.1MPa的高压蒸汽灭菌20～30分钟，得到第一培养基；

2）制备第一种子：将产朊假丝酵母或热带假丝酵母菌种在无菌环境中接种至第一培养基中，在35～38℃恒温条件下静止培养48～72h，得到第一种子；

3）制备第一种子培养基：5-10°的麦芽汁，用0.1MPa的高压蒸汽灭菌20-30分钟，得到第一种子培养基；

4）制备第一种子培养液：将第一种子在无菌环境下用接种针接种至第一种子培养基中，在温度为35～38℃、频率为100～120r/min的条件下振荡培养24～48h，得到第一种子培养液。

4.根据权利要求2所述的氨基酸叶面肥的制备方法，其特征在于，所述第二种子培养液的制备方法如下：

1）制备第二培养基：将酪素8～10g、Na₂HPO₄·H₂O1～1.5g、KH₂PO₄·3H₂O0.3～0.5g、NaCl0.05～0.15g、ZnSO₄0.02～0.03g、CaCl₂0.2～0.3g和琼脂15～20g用蒸馏水定容至1000mL，pH值为7.0～7.2，用0.1MPa的高压蒸汽灭菌20～30分钟，得到第二培养基；

2）制备第二种子：将枯草芽孢杆菌菌种在无菌环境中接种至第二培养基中，在32～35℃恒温条件下静止培养50～72h，得到第二种子；

3）制备第二种子培养基：将玉米粉20～30g，豆粕粉50～60g，K₂HPO₄.3H₂O2～5g，用0.1MPa的高压蒸汽灭菌20～30分钟，得到第二种子培养基；

4）制备第二种子培养液：将第二种子在无菌环境下用接种针接种至第二种子培养基中，在温度为32～35℃、频率为120～160r/min的条件下振荡培养30～48h，得到第二种子培养液。