[发明专利]一种双中性蛋白酶分步酶解热榨花生粕制备花生肽的方法

权利要求书

1.一种双中性蛋白酶分步酶解热榨花生粕制备花生肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、将热榨花生粕与蒸馏水混合，制备质量浓度为13～15％的热榨花生粕溶液，并测定所述热榨花生粕中花生蛋白的含量；

步骤二、调节并保持所述热榨花生粕溶液的温度为40～50℃，向所述热榨花生粕溶液中加入中性蛋白酶，进行酶解反应1.5～2.0h，得到第一酶解液，其中所述中性蛋白酶的加入量根据所述热榨花生粕溶液的质量浓度及所测定的热榨花生粕中花生蛋白的含量计算得到；

步骤三、向所述第一酶解液中加入复合蛋白酶，保持温度40～50℃，进行酶解反应2.0～3.0h，得到第二酶解液，其中所述复合蛋白酶的加入量根据所述热榨花生粕溶液的质量浓度及所测定的热榨花生粕中花生蛋白的含量计算得到；

步骤四、将所述第二酶解液中的所述中性蛋白酶和复合蛋白酶灭活，离心取上清液，得到花生肽溶液。

2.如权利要求1所述的双中性蛋白酶分步酶解热榨花生粕制备花生肽的方法，其特征在于，步骤二中所述中性蛋白酶的酶解反应时间为1.5h，温度为45℃。

3.如权利要求2所述的双中性蛋白酶分步酶解热榨花生粕制备花生肽的方法，其特征在于，步骤三中所述复合蛋白酶的酶解反应时间为2.5h，温度为45℃。

4.如权利要求3所述的双中性蛋白酶分步酶解热榨花生粕制备花生肽的方法，其特征在于，步骤二中所述中性蛋白酶的加入量为5200～6500U／g花生蛋白，步骤三中所述复合蛋白酶的加入量为249～499U／g花生蛋白。

5.如权利要求4所述的双中性蛋白酶分步酶解热榨花生粕制备花生肽的方法，其特征在于，步骤二中所述中性蛋白酶的加入量为5200U／g花生蛋白，步骤三中所述复合蛋白酶的加入量为374U／g花生蛋白。

6.如权利要求5所述的双中性蛋白酶分步酶解热榨花生粕制备花生肽的方法，其特征在于，所述热榨花生粕中花生蛋白的含量通过凯氏定氮法测定。

7.如权利要求1所述的双中性蛋白酶分步酶解热榨花生粕制备花生肽的方法，其特征在于，步骤一中所述热榨花生粕溶液的质量浓度为14％。

8.如权利要求1所述的双中性蛋白酶分步酶解热榨花生粕制备花生肽的方法，其特征在于，步骤四中通过将所述第二酶解液升温至90～95℃，并保持该温度10～20min进行所述中性蛋白酶和复合蛋白酶的灭活；所述离心的条件为4000～4500rpm离心20～30min。

9.如权利要求1所述的双中性蛋白酶分步酶解热榨花生粕制备花生肽的方法，其特征在于，步骤三中所述复合蛋白酶由内切酶和外切酶组成，步骤二中所述的中性蛋白酶由枯草芽孢杆菌经过发酵提取得到。

10.如权利要求6、7或8所述的双中性蛋白酶分步酶解热榨花生粕制备花生肽的方法，其特征在于，步骤四中所得到的花生肽溶液经过干燥，制备为固体花生肽。