[发明专利]猪细环病毒I型和II型的双重实时荧光PCR检测方法无效
| 申请号： | 201410105912.5 | 申请日： | 2014-03-20 |
| 公开（公告）号： | CN103882149A | 公开（公告）日： | 2014-06-25 |
| 发明（设计）人： | 杨春华;孙思扬;胡婷;石磊 | 申请（专利权）人： | 江西出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 44281 | 代理人： | 罗瑶;彭家恩 |
| 地址： | 330026 江*** | 国省代码： | 江西;36 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 猪细环 病毒 ii 双重 实时 荧光 pcr 检测 方法 | ||
1.一种用于猪细环病毒I型和II型的双重检测的引物，其特征在于：所述引物包括第一引物对和第二引物对，所述第一引物对的上游引物和下游引物分别含有Seq ID No.1和Seq ID No.2所述序列，所述第二引物对的上游引物和下游引物分别含有Seq ID No.4和Seq ID No.5所述序列；
Seq ID No.1：5’-GGTTCAGGAGGCTCAATTTGG-3’
Seq ID No.2：5’-TTTGAATTTAACGGTTTTCAGTCTTC-3’
Seq ID No.4：5’-TATCGGGCAGGCGGTAATC-3’
Seq ID No.5：5’-TACGCTACCGTCAGCCATCTTT-3’。
2.根据权利要求1所述的引物，其特征在于：所述第一引物对为检测猪细环病毒I型的引物对，所述第二引物对为检测猪细环病毒II型的引物对。
3.一种用于猪细环病毒I型和II型的双重检测的探针，其特征在于：所述探针包括第一探针和第二探针，所述第一探针含有Seq ID No.3所示序列，所述第二探针含有Seq ID No.6所示序列；
Seq ID No.3：5’-TCGCTTCGCTCGCACCACGT-3’
Seq ID No.6：5’-AACCGGGCCCCCCTCGATG-3’。
4.根据权利要求3所述的探针，其特征在于：所述第一探针为检测猪细环病毒I型的探针，所述第二探针为检测猪细环病毒II型的探针。
5.根据权利要求4所述的探针，其特征在于：所述第一探针和第二探针的5’端都标记有荧光报告基团，3’端都标记有荧光淬灭基团。
6.根据权利要求5所述的探针，其特征在于：所述第一探针的5’端标记的荧光报告基团为FAM，3’端标记的荧光淬灭基团为BHQ1；所述第二探针的5’端标记的荧光报告基团为HEX，3’端标记的荧光淬灭基团为BHQ1。
7.一种猪细环病毒I型和II型的双重实时荧光PCR检测方法，包括采用权利要求1或2所述的引物与权利要求5或6所述的探针配对进行Taqman荧光定量PCR检测。
8.根据权利要求7所述的双重实时荧光PCR检测方法，其特征在于：所述第一引物对与所述第一探针配对用以检测猪细环病毒I型，所述第二引物对与所述第二探针配对用以检测猪细环病毒II型。
9.一种猪细环病毒I型和II型的双重检测的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中含有权利要求1或2所述的引物。
10.根据权利要求9所述的试剂盒，其特征在于：所述检测试剂盒中还含有权利要求3-6任一项所述的探针。
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