[发明专利]一种同时检测人体尿液中多种有机酸含量的方法

权利要求书

1.一种同时检测人体尿液中多种有机酸含量的方法，其特征在于：检测的方法具体包括以下步骤：

A.收集晨尿或任意时间段的尿液，并加入0.4mg/mL的内标溶液；

B.加入0.5mg/mL盐酸羟胺溶液和10mol/L氢氧化钠溶液，对尿样中的有机酸进行肟化反应，充分涡旋混匀静置1h；

C.加12mol/L浓盐酸，再加入乙酸乙酯和乙醚充分混匀后，离心5min，混匀；吸取上层有机相放入干净离心管；用99.999％氮气吹干；

D.加入衍生化试剂，放入吹氮仪底座或温箱，条件温度65℃，衍生化30min，所述衍生化试剂包括BSTFA和TMCS，二者的比例为97～99.5∶0.5～3；

E.进样，利用气质联用仪进行分析。

2.根据权利要求1所述的同时检测人体尿液中多种有机酸含量的方法，其特征在于：步骤A中所述的尿液为含有0.2mg肌酐的尿液。

3.根据权利要求1所述的同时检测人体尿液中多种有机酸含量的方法，其特征在于：步骤A中所述的内标溶液的加入量为20μL，该内标溶液是将内标物溶于去离子水中进行制备。

4.根据权利要求3所述的同时检测人体尿液中多种有机酸含量的方法，其特征在于：所述的内标物为2-苯基丁酸。

5.根据权利要求1所述的同时检测人体尿液中多种有机酸含量的方法，其特征在于：步骤B中所述的盐酸羟胺溶液的加入量为100μL，该盐酸羟胺溶液为盐酸羟胺的水溶液。

6.根据权利要求1所述的同时检测人体尿液中多种有机酸含量的方法，其特征在于：步骤B中所述10mol/L氢氧化钠溶液的加入量为300μL，该氢氧化钠溶液为氢氧化钠的水溶液。

7.根据权利要求1所述的同时检测人体尿液中多种有机酸含量的方法，其特征在于：步骤C中所述的浓盐酸的加入量为300μL，所述乙酸乙酯和乙醚的加入量均为2mL。

8.根据权利要求1所述的同时检测人体尿液中多种有机酸含量的方法，其特征在于：步骤D中所述的衍生化试剂的加入量为100μL。

9.根据权利要求1所述的同时检测人体尿液中多种有机酸含量的方法，其特征在于：步骤D中所述的BSTFA和TMCS的比例为99∶1。

10.根据权利要求1所述的同时检测人体尿液中多种有机酸含量的方法，其特征在于：步骤E中：所用气质联用仪的具体参数：毛细管色谱柱长30m，膜厚0.25μm，柱温箱起始温度70℃，3min，以10℃/min升温至260℃，然后再以20℃/min升温至280℃，2min，进样口温度250℃99.999％的氦气总流速为23.4mL/min，分流比20∶1离子源温度280℃，扫描范围50～550m/z。