[发明专利]一种诱导多能性干细胞的培养体系

权利要求书

1.一种用于诱导多能性干细胞的培养基，所述培养基为LBX液体培养基，包括氨基酸、维生素、无机盐及其它组分；

其中，所述氨基酸包括50-150mg/L的L-精氨酸盐酸盐、10-20mg/L的L-组氨酸盐酸盐一水物、25-50mg/L的L-异亮氨酸、25-50mg/L的L-亮氨酸、40-80mg/L的L-赖氨酸盐酸盐、7-15mg/L的L-蛋氨酸、18-40mg/L的L-苯丙氨酸、17-40mg/L的L-丝氨酸、17-60mg/L的L-苏氨酸、2-8mg/L的L-色氨酸、15-50mg/L的L-酪氨酸二钠盐和10-60mg/L的L-缬氨酸；

所述维生素包括0.5-8mg/L的氯化胆碱、0.5-5mg/L的D-泛酸钙、0.5-4mg/L的叶酸、0.5-4mg/L的烟酰胺、0.5-4mg/L的盐酸吡哆醇、0.05-1mg/L的核黄素、0.5-4mg/L的盐酸硫胺素和1-10mg/L的肌醇；

所述无机盐包括30-100mg/L的无水氯化钙、2-30mg/L的无水硫酸镁、80-300mg/L的氯化钾、300-1000mg/L的碳酸氢钠、1000-5000mg/L的氯化钠和20-100mg/L的磷酸二氢钠；

所述其它组分包括500-2000mg/L的D-葡萄糖、500-2000mg/L的羟乙基哌嗪乙磺酸、0.005-0.1mg/L的辛硫酸、50-400mg/L的腐胺、100-600mg/L的丙酮酸钠、0.04-0.40mg/L的胸苷、4-50mg/L的L-肉碱、2000-20000mg/L的人转铁蛋白、0.2-3mg/L的孕酮、0.05-2mg/L的亚硒酸盐钠、2-80mg/L的乙醇胺、50-400mg/L的D-半乳糖、40-400mg/L的过氧化氢酶、2-40mg/L的谷胱甘肽、4-80mg/L的超氧化物歧化酶、30-400mg/L的视黄醇、30-400mg/L的视黄醇乙酸酯、300-4000mg/L的维生素E、300-4000mg/L的维生素E醋酸酯、0.05-0.5mg/ml的牛血清白蛋白、0.5-5μg/ml的胰岛素、500-4000U/ml的白血病抑制因子和4-100ng/ml的碱性成纤维细胞生长因子。

2.根据权利要求1所述的培养基，其中，所述氨基酸还包括以下氨基酸中的一种或多种：10-50mg/L的甘氨酸、2-40mg/L的L-丙氨酸、0.83-50mg/L的L-天冬酰胺一水合物、6-50mg/L的L-天冬氨酸、1-20mg/L的L-半胱氨酸、4-100mg/L的L-精氨酸盐酸盐一水物、4-30mg/L的L-半胱氨酸二盐酸盐、5-70mg/L的L-谷氨酸、7-100mg/L的L-脯氨酸。

3.根据权利要求1所述的培养基，其中，所述维生素还包括以下维生素中的一种或多种：0.5-4mg/L的维生素H、0-10mg/L的维生素b12。

4.根据权利要求1所述的培养基，其中，所述无机盐还包括以下无机盐中的一种或多种：0-0.001mg/L的五水硫酸铜、0-0.01mg/L的九水硝酸铁、0-0.5mg/L的七水硝酸铁、0-50mg/L的无水氯化镁、4-50mg/L的无水磷酸氢二钠、0-5mg/L的七水硫酸锌。

5.根据权利要求1所述的培养基，其中，所述其它组分包括以下的一种或多种：0.1-1mg/L的次黄嘌呤钠、400-2000mg/L的亚油酸、0-5mg/L的酚红、0.005-0.05mg/L的腐胺二盐酸、0-3000mg/L的亚麻酸、0.4-4mM的L-谷酰胺、20-200μg/ml的链霉素溶液、20-200U/mL的青霉素、0-0.1mM的β-硫基乙醇、0.5-5μM的转化生长因子抑制剂(SB431542)、0.5-3μM丝裂原活化蛋白激酶抑制剂(PD0325901)、1-10μM的肝糖原合成激酶3β(GSK3β)受体的选择性抑制剂(CHIR99021)、10-200ng/ml的维生素C。

6.根据权利要求1所述的培养基，所述培养基包括下表所述的组分：