[发明专利]一种桑树品种亲缘关系DNA分子评鉴方法

权利要求书

1.一种桑树品种亲缘关系DNA分子评鉴方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）桑树品种的系统发育分析：

1）取材；

2）筛选对比序列；

3）桑树基因组DNA提取及浓度、纯度检测；

4）PCR扩增；

5）PCR检测；

6）PCR测序；

7）序列拼接、对比，鉴定进化关系；

（2）桑树品种的亲缘关系分析：

采用DNA分子标记方法对步骤7）获得的进化关系进行亲缘关系分析，获得分析结果。

2.根据权利要求1所述的一种桑树品种亲缘关系DNA分子评鉴方法，其特征在于：所述步骤2）中对比序列为核rDNA内转录间隔区ITS，5SrRNA基因间隔区NTS，26S-18SrRNA基因间隔区IGS序列。

3.根据权利要求1所述的一种桑树品种亲缘关系DNA分子评鉴方法，其特征在于：所述步骤3）中取步骤1）中经硅胶干燥处理后的桑树品种样本0.10—0.20g，通过2—4倍CTAB提取液提取获得桑树基因组DNA并进行浓度、纯度检测及复核。

4.根据权利要求3所述的一种桑树品种亲缘关系DNA分子评鉴方法，其特征在于：所述步骤3）中桑树品种样品通过4倍CTAB提取液提取获得基因组DNA.。

5.根据权利要求3或4所述的一种桑树品种亲缘关系DNA分子评鉴方法，其特征在于：所述步骤3）中干燥桑树品种样本的称取量为0.15g。

6.根据权利要求1所述的一种桑树品种亲缘关系DNA分子评鉴方法，其特征在于：所述步骤4）PCR扩增反应引物为核rDNA内转录间隔区ITS。

7.根据权利要求6所述的一种桑树品种亲缘关系DNA分子评鉴方法，其特征在于：所述步骤4）PCR扩增反应程序为94℃预变性4min，94℃变性1min、55℃退火1min、72℃延伸1min、每个循环94℃变性1min、55℃退火1min、72℃延伸1min共33个循环，72℃延伸7min，反应结束控制在12℃。

8.根据权利要求1所述的一种桑树品种亲缘关系DNA分子评鉴方法，其特征在于：所述步骤2）中所用对比序列为转录组测序。

9.根据权利要求1所述的一种桑树品种亲缘关系DNA分子评鉴方法，其特征在于：所述步骤2）中所用对比序列为全基因组测序。

10.根据权利要求1所述的一种桑树品种亲缘关系DNA分子评鉴方法，其特征在于：所述步骤（2）DNA分子标记方法为ISSR方法或SSR方法。