[发明专利]检测细菌对氟苯尼考耐药性的LAMP方法无效
| 申请号： | 201410118217.2 | 申请日： | 2014-03-27 |
| 公开（公告）号： | CN103937883A | 公开（公告）日： | 2014-07-23 |
| 发明（设计）人： | 李军;曾芸;冯世文;杨威;陈泽祥;潘艳;刘丽娅;彭昊;许力干;马春霞;胡帅;禤雄标;柳峰;谢永平;谢宇舟;钟舒红 | 申请（专利权）人： | 广西壮族自治区兽医研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/18;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广西南宁公平专利事务所有限责任公司 45104 | 代理人： | 杨立华 |
| 地址： | 530001 广西*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 检测 细菌 氟苯尼考 耐药性 lamp 方法 | ||
【权利要求书】：
1.检测细菌对氟苯尼考耐药性的LAMP引物组，其特征在于包括外引物对F3和B3、内引物对FIP和BIP，它们分别具有序列表SEQ.ID.No.1至SEQ.ID.No.4的碱基序列。
2.一种检测细菌对氟苯尼考耐药性的LAMP方法，其特征在于：利用LAMP引物组，在63℃恒温反应条件下，进行环介导恒温扩增反应60min；所述LAMP引物组包括外引物对F3和B3、内引物对FIP和BIP，它们分别具有序列表SEQ.ID.No.1至SEQ.ID.No.4的碱基序列。
3.根据权利要求1所述的检测细菌对氟苯尼考耐药性的LAMP方法，其特征在于扩增反应的反应体系以25μL计，包括：2×Reaction Mix12.5μL，Bst DNA Polymerase1μL，Primer FIP40pmol、BIP40pmol、F35pmol、B35pmol，细菌质粒DNA2μL，Distilled Water补足25μL。
4.根据权利要求1所述的检测细菌对氟苯尼考耐药性的LAMP方法，其特征在于：所述扩增反应在Loopamp实时浊度仪内全程密闭监控进行。
5.根据权利要求1所述的检测细菌对氟苯尼考耐药性的LAMP方法，其特征在于：所述扩增反应后采用钙黄绿素荧光染料进行荧光检测，荧光染料在反应前加入。
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