[发明专利]在水稻中高效表达Bt蛋白Cry30Fa1的方法有效
| 申请号： | 201410119119.0 | 申请日： | 2014-03-27 |
| 公开（公告）号： | CN103937816A | 公开（公告）日： | 2014-07-23 |
| 发明（设计）人： | 朱军;张钦斌;李平;邓其明;李双成;刘怀年;王世全;王玲霞;郑爱萍 | 申请（专利权）人： | 四川农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/32 | 分类号： | C12N15/32;C12N15/75;C12N1/21;C12N15/11;C12N15/84;A01H5/00;A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君 |
| 地址： | 611130 四川省成都市温江*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 水稻 高效 表达 bt 蛋白 cry30fa1 方法 | ||
1.编码Bt蛋白Cry30Fa1的基因，其特征在于，其核苷酸序列为：
i）Seq ID No.1；或
ii）Seq ID No.1所示的核苷酸序列经取代、缺失和/或增加一个或多个核苷酸且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列；或
iii）在严格条件下与Seq ID No.1所示序列杂交的核苷酸序列；
所述严格条件为在含0.1%SDS的0.1×SSPE或含0.1%SDS的0.1×SSC溶液中，在65℃下杂交，并用该溶液洗膜。
2.含有权利要求1所述基因的载体。
3.含有权利要求1所述基因的工程菌。
4.权利要求1所述基因或权利要求2所述载体在制备转基因植物中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述植物为水稻。
6.用于扩增权利要求1所述基因的特异性引物对，其特征在于，包括正向引物F5'-GCGCATATGATGAAGCCGTACCAGAGCGAGAAT-3'和反向引物R5'-CGGAATTCTTAGTTCACTGGACAAGCAAACGCA-3'。
7.一种在水稻中高效表达Bt蛋白Cry30Fa1的方法，其特征在于，采用农杆菌介导的方法，将权利要求2所述的载体转入水稻愈伤组织中，转化的材料经过共培养-筛选-分化-生根-转基因苗的锻炼和移栽，筛选高效表达Bt蛋白Cry30Fa1的转基因水稻植株。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述载体为植物双元表达载体。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述载体的出发载体为pCDMAR-Hyg。
10.根据权利要求7-9任一项所述的方法，其特征在于，使用的水稻品种为蜀恢818。
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