[发明专利]一种龙虎人丹植物药中的6种挥发性成分的含量检测方法

权利要求书

1.一种龙虎人丹植物药中6种挥发性成分含量的检测方法，该方法由以下步骤组成：

(1)配制供试品溶液：取龙虎人丹植物药用溶剂配制成0.5～5mg/ml的供试品溶液；

配制对照品溶液：精密称取对照品适量，置于10mL容量瓶中，用溶剂溶解并稀释至刻度。摇匀，得各对照品储备液，置于4℃冰箱保存。

精密量取各储备液适量，用乙酸乙酯稀释，得各对照品的混合标准溶液。向混合对照品溶液中加入内标物萘10-20μL，内标物的终浓度为25-50μg/mL。

按进样量为1～10μL对VF-WAXms毛细管色谱柱进样，载气为氦气，采用程度升温方法：初始温度为60-90℃，维持1-2分钟，以25-50℃每分钟的升温速率升至240-260℃，维持1分钟，进样口温度：240-260℃，不分流，流速为2.5mL·min-1，溶剂延迟：4min，进样2μL。

获得供试品药物及对照品药物的离子色谱图；

(2)所得对照品溶液的离子色谱图从左至右分别为薄荷醇、异龙脑、冰片、萘(内标物)、茴香脑、丁香酚、乙酰丁香酚。

供试品的离子色谱图与对照品溶液的图谱比较，相应成分的保留时间相同的峰即是与该成分相同物质的特征峰，6种成分分别按照回归方程1-6的标准曲线计算含量：1、Y＝0.0507+1.1872＊X，2、Y＝0.0193+4.1578＊X，3、Y＝0.0413+5.9509＊X，4、Y＝Y＝-0.0003+0.3985＊X，5、Y＝-0.0070+5.4679＊X，6、Y＝-0.0029+8.9213＊X；

上述步骤中，

配制供试品溶液或对照品溶液所用的溶剂为乙酸乙酯，或者是与之流动性相似的溶剂；

实验中质谱条件为：离子源为EI，碰撞气为氦气及氮气，流速分别为2.25mL·min-1流速为1.5mL·min-1，EI源温度为250℃，电离能量为70Ev，分析时间为8.6分钟。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述程序升温方法为：初始温度为70-80℃，维持1分钟，以25-40℃每分钟的升温速率升至245-260℃，维持1分钟，进样口温度：240-250℃，不分流，流速为2.5mL·min-1，溶剂延迟：4分钟，进样2μL。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述程序升温方法为：初始温度为80℃，维持1分钟，以25℃每分钟的升温速率升至245℃，维持1分钟，进样口温度：250℃，不分流，流速为2.5mL·min-1，溶剂延迟：4min，进样2μL。

4.根据权利要求1～3之一所述的检测方法，其特征在于所述供试品配制过程中的稀释溶剂为乙酸乙酯。

5.根据权利要求1～3之一所述的检测方法，其特征在于当龙虎人丹植物药为固态时，所述的供试品溶液的制作方法为：龙虎人丹粉碎成细粉，称取粉末30mg，加乙酸乙酯6mL，超声处理20-30分钟，称定重量，补足所失重量，10000-15000rpm离心10min后取上清，加入内标物萘20μL，进样。

6.根据权利要求1～3之一所述的检测方法，其特征在于当龙虎人丹植物药为固态时，所述的供试品溶液的制作方法为索氏提取法：即龙虎人丹粉碎成细粉，称取龙虎人丹粉末30mg，加10mL乙酸乙酯，索式提取20-30分钟，10000-15000rpm离心10分钟后取上清，加入内标物萘20μL，进样。

7.根据权利要求1～3之一所述的检测方法，其特征在于当龙虎人丹植物药为固态时，所述的供试品溶液的制作方法为加热回流法：即龙虎人丹粉碎成细粉，称取龙虎人丹粉末30mg，加10mL乙酸乙酯，加热回流20-30分钟，10000-15000rpm离心10分钟后取上清，加入内标物萘20μL，进样。

8.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于当龙虎人丹植物药为固态时，优选超声处理30分钟，12000rpm离心。

9.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于可以使用乙酸丁酯代替供试品溶液的制作过程中所使用的乙酸乙酯。

10.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于可以使用异丙醇代替供试品溶液的制作过程中所使用的乙酸乙酯。