[发明专利]一种龙虎人丹植物药中的6种挥发性成分的含量检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及中药成分的含量测定方法及其质量控制方法，具体涉及龙虎人丹植物药的含量检测法及其质量控制方法。

背景技术

龙虎人丹(国药准字Z20025168)创制于1909年，由黄楚九先生根据古方“诸葛行军散”化裁而来，主要由薄荷脑、丁香、肉桂、儿茶、甘草等十一味中药构成，其功能主治为清暑开窍，辟秽排浊，驱风健胃。1923年″龙虎牌″和″人丹及图案″商标向政府申请并获核准，成为国内第一个规范的医药注册商标，是上海乃至中国的民族制药工业发端的标志。百年来龙虎人丹产品销售经久不衰，成为销售过亿的独家传统中药品种。

由于龙虎人丹由中药制成，受到药物产地、采收季节及制备工艺等多种因素的影响，制成的制剂在确保疗效一致性上具有较大难度。因此，有必要对龙虎人丹植物药的成分的组成和含量进行严格的质量控制。目前，关于龙虎人丹的质量控制方法主要有显微鉴别、薄层鉴别、高效液相色谱法和气相色谱法，张玉杰等利用气相色谱法测定其中冰片、薄荷脑的含量，上述方法只针对龙虎人丹中的单个成分，检测时间较长，样品检测前处理步骤复杂等。到目前为止，未见有关龙虎人丹中同时检测多种成分的研究报道，无该复方中(1)薄荷醇、(2)异龙脑、(3)冰片、(4)茴香脑、(5)丁香酚、(6)乙酰丁香酚6种挥发性成分的同时测定方法。

发明内容

本发明的主要目的是利用气质联用技术，对龙虎人丹植物药中6种挥发性成分进行定性定量分析，确保产品质量稳定。

本发明所采用的技术方案：

一种龙虎人丹植物药中6种挥发性成分含量的检测方法，该方法由以下步骤组成：

(1)配制供试品溶液：取龙虎人丹植物药用溶剂配制成0.5～5mg/ml的供试品溶液；

配制对照品溶液：精密称取对照品适量，置于10mL容量瓶中，用溶剂溶解并稀释至刻度。摇匀，得各对照品储备液，置于4℃冰箱保存。

精密量取各储备液适量，用乙酸乙酯稀释，得各对照品的混合标准溶液。向混合对照品溶液中加入内标物萘10-20μL，内标物的终浓度为25-50μg/mL。

按进样量为1～10μL对VF-WAXms毛细管色谱柱进样，载气为氦气，采用程度升温方法：初始温度为60-90℃，维持1-2分钟，以25-50℃每分钟的升温速率升至240-260℃，维持1分钟，进样口温度：240-260℃，不分流，流速为2.5mL·min-1，溶剂延迟：4min，进样2μL。

获得供试品药物及对照品药物的离子色谱图；

(2)所得对照品溶液的离子色谱图从左至右分别为薄荷醇、异龙脑、冰片、萘(内标物)、茴香脑、丁香酚、乙酰丁香酚。

供试品的离子色谱图与对照品溶液的图谱比较，相应成分的保留时间相同的峰即是与该成分相同物质的特征峰，6种成分分别按照表1中回归方程1-6的标准曲线计算含量：

表1

上述步骤中，

配制供试品溶液或对照品溶液所用的溶剂为乙酸乙酯，或者是与之流动性相似的溶剂；

实验中质谱条件为：离子源为EI，碰撞气为氦气及氮气，流速分别为2.25mL·min-1流速为1.5mL·min-1，EI源温度为250℃，电离能量为70Ev，分析时间为8.6分钟。

本发明中优选的程度升温方法为：

初始温度为70-80℃，维持1分钟，以25-40℃每分钟的升温速率升至245-260℃，维持1分钟，进样口温度：240-250℃，不分流，流速为2.5mL·min-1，溶剂延迟：4分钟，进样2μL。

本发明中最优选的程度升温方法为：

初始温度为80℃，维持1分钟，以25℃每分钟的升温速率升至245℃，维持1分钟，进样口温度：250℃，不分流，流速为2.5mL·min-1，溶剂延迟：4min，进样2μL。

本发明中供试品配制过程中的稀释溶剂为乙酸乙酯。

本发明中所述龙虎人丹植物药为固态时，其供试品溶液的制作方法可以为：龙虎人丹粉碎成细粉，称取粉末30mg，加乙酸乙酯6mL，超声处理20-30分钟，称定重量，补足所失重量，10000-15000rpm离心10min后取上清，加入内标物萘20μL，进样。

本发明中所述龙虎人丹植物药为固态时，其供试品溶液的制作方法可以为索氏提取法：即龙虎人丹粉碎成细粉，称取龙虎人丹粉末30mg，加10mL乙酸乙酯，索式提取20-30分钟，10000-15000rpm离心10分钟后取上清，加入内标物萘20μL，进样。