[发明专利]用于发酵制备喷司他丁的发酵培养基及发酵制备方法

权利要求书

1.一种用于发酵制备喷司他丁的发酵培养基，其特征是包括下述组份：碳源3～10g，氮源21～60g，(NH₄)₂SO₄0～0.5g，加水至1L。

2.根据权利要求1所述的一种用于发酵制备喷司他丁的发酵培养基，其特征是所述碳源为3～7g，氮源为35～50g，(NH₄)₂SO₄为0～0.3g。

3.根据权利要求2所述的一种用于发酵制备喷司他丁的发酵培养基，其特征是所述碳源为4～5g，氮源为42～45g(NH₄)₂SO₄为0～0.1g。

4.根据权利要求1、2或3所述的一种用于发酵制备喷司他丁的发酵培养基，其特征是所述碳源为：葡萄糖、糊精、麦芽糖醇、可溶性淀粉、山梨醇、木糖醇或大米粉。

5.根据权利要求1、2或3所述的一种用于发酵制备喷司他丁的发酵培养基，其特征是所述氮源为：酵母浸粉、麦芽浸粉、高温豆粕粉、棉籽粉、脱脂豆粉、麸皮和秘鲁鱼粉至少一种。

6.一种发酵制备喷司他丁的方法，其特征是包括如下步骤：

（1）将链霉菌Streptomyces sp.ATCC39365接种到摇瓶种子培养基中，在200～350r/min，28～34℃摇床中，培养36～72h，得到种子液；

（2）将种子液按体积接种量为3%～20%的比例接种到发酵培养基中，在150～300r/min，28～34℃摇床中，培养200～400h，收集发酵液；

或将种子液按体积接种量为6%～10%的比例接种到发酵培养基中，装液量为5L/7L发酵罐，温度为30～32℃，通风量为0.5～3vvm，搅拌转速为100～500r/min，溶氧与通风量和搅拌转速偶联为30%～50%，控制pH=7.3～7.9，培养167～389h，收集发酵液；

或将种子液按体积接种量为6%～10%的比例接种到发酵培养基中，装液量为5L/7L发酵罐，0～24h温度为32～34℃，24h～312h温度为31～33℃，312～403h温度为33～35℃，搅拌转速为100～500r/min，通风量为0.5～2vvm,溶氧与通风量和搅拌转速偶联为30%～50%，控制pH=7.3～7.9，培养167～389h，收集发酵液。

7.根据权利要求6所述的一种发酵制备喷司他丁的方法，其特征是所述步骤（1）为：将链霉菌Streptomyces sp.ATCC39365接种到摇瓶种子培养基中，在250～300r/min，32～34℃摇床中，培养48～60h，得到种子液。

8.根据权利要求6所述的一种发酵制备喷司他丁的方法，其特征是所述步骤（2）为：将种子液按体积接种量为4%～15%的比例接种到发酵培养基中，在200～300r/min，30～32℃摇床中，培养272～389h，收集发酵液；

或将种子液按体积接种量为6%～10%的比例接种到发酵培养基中，装液量为5L/7L发酵罐，温度为30～32℃，通风量为0.5～3vvm，搅拌转速为100～500r/min，溶氧与通风量和搅拌转速偶联为35%～40%，控制pH=7.6～7.9，培养256～356h，收集发酵液；

或将种子液按体积接种量为6%～10%的比例接种到发酵培养基中，装液量为5L/7L发酵罐，0～24h温度为33℃，24h～312h温度为32℃，312～403h温度为35℃，搅拌转速为100～500r/min，通风量为0.5～2vvm,溶氧与通风量和搅拌转速偶联为35%～40%，控制pH=7.6～7.9，培养256～356h，收集发酵液。

9.根据权利要求6或8所述的一种发酵制备喷司他丁的方法，其特征是所述发酵培养基包括下述组份：碳源3～10g，氮源21～60g，(NH₄)₄SO₄0～0.5g，加水至1L。

10.根据权利要求9所述的一种发酵制备喷司他丁的方法，其特征是所述碳源为3～7g，氮源为35～50g，(NH4)₄SO₄为0～0.3g。